بررسي بيان و اثر SPTBN4-miR1 در روند تمايز عصبي سلول‌هاي NT2

Investigation of the Expression and the Effect of SPTBN4-miR1 in Process of Nerve Differentiation of NT2 Cells

ژن SPTBN4 از اعضاي خانواده پروتئيني اسپكترين در فرآيندهاي مختلف سلول از جمله چرخه سلولي، تكوين سلول‌هاي عصبي و غيره نقش ايفا مي‌كند. اخيراً يك miRNA جديد در اين ژن SPTBN4 پيدا شده كه در پايگاه NCBI به ثبت رسيده است. هدف از مطالعه حاضر، بررسي بيان اين miRNA، با نام SPTBN4-miR1 در روند تمايز سلول‌هاي بنيادي كارسينوماي جنيني NT2 و همچنين بررسي اثر بيش‌بياني آن بر روند تمايزي اين سلول‌ها است. نتايج RT-qPCR بيانگر آن بود كه SPTBN4-miR1-5p و SPTBN4-miR1-3p در روند تمايز عصبي افزايش بيان معني‌داري را از روز سوم شروع و تا روزهاي 8 و 14 تمايزي نشان مي‌دهند. سپس، بعد از بيش بيان پيش‌ساز SPTBN4-miR1 در سلول‌هاي NT2 و تيمار با رتينوئيك‌اسيد، بررسي بيان ماركرهاي پرتواني و تمايزي، بيانگر نقش SPTBN4-miR1-5p و SPTBN4-miR1-3p در پيشبرد تمايز و خروج از حالت پرتواني بود. به نظر مي‌رسد با انجام مطالعات بيشتر و پيداكردن اهداف احتمالي اين miRNAها، مي‌توان به يك ماركر تمايزي دست يافت و از آن براي بهبود روند تمايز بهره برد.

The SPTBN4 gene, a part of the spectrin protein family, plays important roles in various cellular processes, including cell cycle, nerve cell development, and so on. Recently, a new miRNA has been found in this SPTBN4 gene, which was registered at the NCBI database. The aim of the present study was to investigate the expression of this miRNA, called SPTBN4-miR1, in the process of differentiation of human embryonal carcinoma cell line NT2 and also the overexpression effect of this miRNA on the differentiation of these cells. RT-qPCR results indicate that SPTBN4-miR1-5p and SPTBN4-miR1-3p show a significant increase in expression in the process of neural differentiation from day three until the 8th and 14th day of differentiation. Then, after overexpressing the SPTBN4-miR1 precursor in NT2 cells and retinoic acid treatment, the expression of pluripotent and differentiation revealed the role of SPTBN4-miR1-5p and SPTBN4-miR1-3p in promoting differentiation and exclusion from the pluripotent state. It seems that by making further studies and finding out the possible targets of these miRNAs, a distinctive marker can be achieved and used to improve the differentiation process.