فراواني ژن CTX-M-1 درايزوله‌هايEscherichia coli مولد آنزيم بتالاكتاماز وسيع‌الطيف در نمونه هاي باليني با روش واكنش زنجيره‌اي پليمراز PCR در ياسوج

Frequency of CTX-M-1 Gene in Escherichia coli Isolates of ESBL-Producing Enzyme in Clinical Samples by Polymerase Chain Reaction (PCR) in Yasuj

زمينه و هدف: مقاومت به آنتي‌بيوتيك‌هاي بتالاكتام در ميان ايزوله‌هاي باليني، در اكثر مواقع ناشي از توليد آنزيم‌هاي بتالاكتاماز است. توليد آنزيم‌هاي بتالاكتاماز با طيف وسيع(ESBLs) در ميان ايزوله‌هاي باليني به ويژه باكتري E. coli شيوع فراواني يافته و از آنجا كه اين بتالاكتامازها شامل چندين زير خانواده مي‌باشند، طراحي و استفاده از پرايمرهاي جهاني به منظور شناسايي كامل اين زير خانواده‌ها مي‌تواند مفيد واقع شود، لذا هدف از اين مطالعه تعيين و بررسي فراواني ژن CTX-M-1 در ايزوله‌هايEscherichia coli مولد آنزيم بتالاكتاماز وسيع‌الطيف در عفونت‌هاي ادراري باليني با روش واكنش زنجيره‌اي پليمراز PCR بود. روش بررسي : در اين مطالعه تجربي كه در سال1395 انجام شد، نمونه‌هاي ادراري از آزمايشگاه‌هاي شهر ياسوج جمع‌آوري شد و به آزمايشگاه ميكروبيولوژي دانشگاه علوم پزشكي انتقال داده شد، حساسيت باكتري‌هاي جدا شده نسبت به 13 آنتي‌بيوتيك با روش انتشار ديسك بر اساس دستورالعمل CLSI تعيين و سويه‌ها با روش سينرژي دو ديسك از نظر وجود آنزيم‌هاي بتالاكتاماز طيف گسترده بررسي شدند..سپس فراواني ژن CTX-M1، در نمونه‌هاي ESBL با استفاده از روش PCR تعيين شد. داده‌هاي جمع‌آوري شده با استفاده از آزمون آماري آنوا تجزيه و تحليل شدند. يافته‌ها: بررسي حضور ژنCTX-M-1 بر روي 200 ايزوله جداسازي شده E.coli با استفاده از روشPCR انجام گرفت. از 200 سويه مورد بررسي 62 (31 درصد)، سويه مولد بتالاكتامازهاي وسيع‌الطيف بوده، پس از پروسهPCR از62 سويه بتالاكتامازهاي وسيع‌الطيف مثبت 43 ايزوله (4/69 درصد) حاوي ژن CTX-M-1 بوده است. همچنين، در بررسي حساسيت انتي بيوتيكي، بيشترين درصد مقاومت ايزوله ها به .آنتي بيوتيك كوتريموكسازول(50 درصد) و كمترين درصد مقاومت نسبت به آنتي بيوتيك ايميپنم(صفر درصد) مشاهده گرديد. نتيجه‌ گيري: نتايج حاصل از اين مطالعه نشان دهنده درصد بالاي مقاومت بتالاكتامازي در بين سويه‌هاي E.coliمي‌باشد. اين مسئله يك خطر عمومي‌جدي را خاطر نشان مي‌سازد كه بايد همه اقدامات براي جلوگيري از اين خطر صورت گيرد. با توجه به حساسيت ايزوله هاي مقاوم به بتالاكتام مورد مطالعه و ايزوله هاي جداسازي شده در ايران، نسبت به ايمي پنم، براي درمان عفونت هاي بيمارستاني ناشي از اين سويه ها استفاده از يك كارباپنم همراه با يك آنتي بيوتيك غير بتالاكتام پيشنهاد مي گردد

Background & aim: Resistance to β-lactam antibiotics in the clinical isolates, in most cases is caused by β- lactamase enzymes. In recent years, The incidence of broad-spectrum β-lactamase enzymes (ESBLs) among clinical isolates especially E.coli is greatly increased, since the β-lactamase have several subfamilies, using universal primers designed to detect the following complete families could be useful. β-lactamase producing enzymes (ESBLs) of E. coli has created many problems for patients. β-lactamase CTX-M-1 gene is the cause of resistance. The aim of this study was to evaluate CTX-M-1gene in E.coli. Methods: In this practical study, susceptibility of isolated bacteria to 13 antibiotics were indicated by disk diffusion method according to CLSI guidelines and strains were analyzed for the presence of widespread β- lactamase enzymes via two-disc synergy method. Thus، the prevalence of CTX-M1 ESBL gene samples were determined using PCR and the data were analyzed using ANOVA. Results: A total of 200 isolates of E.coli were isolated. The presence of CTX-M-1 gene were also isolated using the PCR method. From 200 strains studied, 62 (31%), of strains produced ESBL. After PCR processing of 62 produced ESBL, 43 isolates (69.4%) were identified as CTX-M-1 genes. Also, antibiotic susceptibility test showed the highest percentage of resistance to Cotrimoxazole antibiotic (50%) and the lowest antibiotic resistance to imipenem (0%). Conclusion: The results of this study showed the high percentage of β-lactamase resistance among of E.coli strains. This is a serious public hazard that should be pointed out to measures for preventing this hazard. Considering the sensitivity of the studied beta-lactam resistant isolates and isolates in Iran to imipenem, a carbapenem with a non-beta-lactam antibiotic is recommended for the treatment of nosocomial infections caused by these strains.