بررسي كمّي تغييرات بيان ژنهاي CXCL10 و CXCL11 در بيماران مبتلا به بيماري سلياك با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي

Evaluation of CXCL10 and CXCL11 Genes in Patients with Celiac Disease by Specific Primer Paris

زمينه: بيماري سلياك يك اختلال سيستم ايمني وابسته به لنفوسيت هاي T است. مطالعات اخير نقش كموكاين هاي CXCL10 و CXCL11 را نشان مي دهد كه عامل ورود سلول هاي ايمني به بافت هاي التهابي و فراخواني لنفوسيت ها به محل التهاب در بيماران مبتلا به سلياك است. لذا هدف از اين مطالعه طراحي پرايمرهاي اختصاصي براي بررسي ژن‌هاي CXCL10 و CXCL11 با تكنيك PCR در بيماران مبتلا به بيماري سلياك و بررسي كمي بيان اين دو ژن در خون اين بيماران در مقايسه با افراد سالم كنترل است. روش كار: در اين مطالعه از 10 بيمار مبتلا به سلياك كه بيماري آنها توسط آزمايشات پاتولوژي و نظر متخصص گوارش تاييد شده بود و همچنين از 10 فرد سالم به عنوان گروه كنترل نمونه خون اخذ گرديد. پس از استخراج RNA و سنتز cDNA، براي نواحي ثابت ژن‌هاي CXCL10و CXCL11 پرايمرهاي اختصاصي exon-exon junction طراحـي و PCR انجام گرديد و بررسي بيان اين دو ژن با تكنيك Real-time PCR صورت گرفت. يافته‌ها: با توجه به نتايج به دست آمده همه پرايمرهاي طراحي شده داراي قابليت بالايي از نظر تكثير قطعات مورد نظر مي باشند و همچنين افزايش بيان معنادار در بيان دو كموكاين CXCL10 و CXCL11 در بيماران مبتلا به سلياك در مقايسه با افراد كنترل مشاهده شد (05/0 >p). نتيجه‌گيري: نتايج ما نشان داد كه تغيير در بيان ژن هاي CXCL10 و CXCL11 در بيماران مبتلا به سلياك نشان دهنده نقش سيستم ايمني ذاتي در پاتوژنز بيماري سلياك است.

Background: Celiac Disease (CD) is a T cell-mediated disorder. Recent studies suggest the role of chemokines CXCL10 and CXCL11 to promote the arrival of cells into inflamed tissues and in lymphocytic recruitment in active CD. The aim of this study was to investigate the new specific primer pairs for analysis of human CXCL10 and CXCL11 genes in blood samples of CD patients by Polymerase Chain Reaction (PCR) technique and to examine the quantitative expression of these genes in the blood of celiac patients compared with healthy controls. Methods: Blood samples were collected from 10 CD patients diagnosed according to the Iranian Society for Pediatric Gastroenterology and Marsh criteria and 10 as a control group after extraction of RNA from patients and cDNA was synthesized. By bioinformatics analysis, the specific regions of the CXCL10 and CXCL11 genes were designed and exon-exon junction specific primers and PCR was performed. Later gene expression analysis was performed with Real-time PCR. Results: According to the results, all designed primers are highly capable of replicating the desired components. Also, there was a significant increase in expression of two chemokines CXCL10 and CXCL11 genes in the celiac patients compared to control groups (P<0.05). Conclusion: Our results from this study showed that changes in the expression of CXCL10 and CXCL11 genes in celiac patients indicate the role of the inherent immune system in the pathogenesis of CD.