جداسازي وزيكول‎هاي ترشحي غشاء خارجي باكتري اشرشياكلي با استفاده از فيلتراسيون با جريان مماسي

زمينه و هدف: وزيكول هاي غشاء خارجي باكتري ها نقش مهمي در فيزيولوژي، بيماري زايي و تعامل بين ميزبان و عامل بيماريزا دارند. اين وزيكول ها به باكتري اجازه مي دهند تا آنزيم ها و محتويات خود را به شكل محافظت شده منتقل كنند و در زنده ماندن باكتري نقش دارند. از آنجايي كه آن ها به عنوان نماينده باكتري محسوب مي شوند، مطالعه آن ها به شناخت بيشتر باكتري ها و تعامل آن ها با محيط كمك مي كند. از اين رو روش هاي جداسازي اين وزيكول ها اهميت ويژه اي دارد. لذا، هدف از اين پژوهش، معرفي روشي نوين براي جداسازي وزيكول هاي غشاء خارجي باكتري اشرشياكلي است. روش كار: در روش شناسي حاضر، باكتري اشرشياكلي انتروتوكسيژنيك در شرايط استاندارد كشت داده شد. سپس مايع رويي كشت جدا گرديد و از فيلتراسيون با جريان مماسي براي تغليظ وزيكول ها و سانتريفيوژ دور بالا براي رسوب دهي آن ها استفاده شد. وزيكول هاي جدا شده توسط ميكروسكوپ الكتروني عبوري تاييد و وزن مولكولي و ميزان غلظت پروتئيني مشخص گرديد. يافته ها: ريخت شناسي وزيكول ها توسط ميكروسكوپ الكتروني تاييد و اندازه آن ها بين 50 تا 100 نانومتر تعيين شد. الگوي الكتروفورتيك نشان دهنده باندهاي قوي و ضعيف در ناحيه بين 4122 كيلودالتون بوده و غلظت پروتئين وزيكول هاي تخليص شده 542 ميكروگرم مشخص گرديد. نتيجه گيري: نتايج به دست آمده نشان مي دهد كه در نتيجه استفاده از روش ارائه شده در اين مطالعه علاوه بر ارائه محصولي همسان، از بعد اقتصادي و زماني نسبت به روش هاي رايج مزاياي مثبتي دارد و مي تواند زمينه ساز جداسازي اين وزيكول ها در سطح صنعتي نيز باشد.