توليد و بررسي آنتي‌بادي پلي‌كلونال موشي عليه انتروتوكسينB استافيلوكوكوس اورئوس

مقدمه: استافيلوكوك اورئوس يك ميكروارگانيسم مهم است كه با ترشح فاكتورهايي كه به‌عنوان سوپر آنتي‌ژن استافيلوكوك شناخته مي‌شوند، باعث ايجاد بيماري‌هاي مختلف در انسان مي‌شود. انتروتوكسينB استافيلوكوكوس اورئوس يك آنتي‌ژن باكتريايي است كه مسئول مسموميت غذايي در انسان مي‌باشد. براي توليد آنتي‌بادي‌هاي پلي‌كلونال، آنتي‌ژن مربوطه به يك حيوان حساس تزريق مي‌شود و سرم محتوي آنتي‌بادي از آن استخراج مي‌شود. سوپر آنتي‌ژن‌هاي باكتري كه فعال‌كننده سلول‌هاي T قوي هستند مي‌توانند بر روي سيستم عصبي مركزي اثرات حاد يا مزمن داشته باشند. اين تحقيق با هدف توليد آنتي‌بادي پلي‌كلونال موشي عليه انتروتوكسين B استافيلوكوكوس اورئوس انجام شده است. مواد وروش‌ها: براي تعيين غلظت پروتئين از روش بردفورد استفاده شد. براي ارزيابي و شناسايي آنتي‌ژن، نمونه‌ها از ژل SDSPAEG بر روي غشاء نيترو سلولزي انتقال داده شد و توسط وسترن بلات آناليز صورت گرفت. ايمن‌سازي موش‌ها در فواصل صفر، دو هفته و چهار هفته به صورت تزريق داخل صفاقي انجام شد. تيتر آنتي‌بادي در آنتي‌سرم جدا شده از حيوان به روش الايزا اندازه‌گيري شد. يافته‌ها: غلظت‌هاي مختلف پروتئين (320 ميكروگرم) با جذب‌هاي مختلف با فرمول y = 0.0279x + 0.1222 محاسبه شد. در ژل آكريل آميد پروتئين باند اضافه ديده نشد. در تجزيه و تحليل وسترن بلات باندهاي حاصل همگي بيانگر تطابق كامل با نمونه استاندارد بوده و عاري از هر گونه پروتئين‌ ناخواسته بود. نتايج آزمايش الايزا در نوبت دوم در 0/05 P معني‌دار بود. در آزمايش دابل ديفيوژن بين نمونه شاهد و آنتي‌ژن باند وجود داشت. نتيجه‌گيري:‌ توكسوئيد تهيه شده خاصيت كشندگي خود را به طور كامل از دست داده و بنابراين مي‌تواند براي ايمن‌سازي و توليد آنتي‌بادي پلي‌كلونال عليه انتروتوكسينB استافيلوكوكوس استفاده شود.