شناسايي اختصاصي كانديدا گلابراتا با استفاده از روش رنگ‌سنجي بر پايه‌ي نانوذرات طلا

مقدمه: كانديدا گلابراتا يكي از شايع‌ترين گونه‌هاي جنس كانديدا است كه به دليل توانايي كسب مقاومت دارويي، شناسايي سريع آن جهت درمان عفونت‌ها ضروري به نظر مي‌رسد. روش‌هاي شناسايي متداول گونه‌هاي كانديدا اغلب وقت‌گير و پر دردسر هستند. امروزه، استفاده از نانوذرات، به دليل خصوصيات منحصر به فردشان، گسترش زيادي يافته است. هدف از تحقيق حاضر، تشخيص سريع آزمايشگاهي كانديدا گلابراتا با استفاده از روش رنگ‌سنجي بر پايه‌ي نانوذرات طلا بود. روش‌ها: كانديدا گلابراتا در محيط مايع Yeasts Extract Peptone Dextrose (YEPD) كشت داده شد و DNA آن استخراج گرديد. سپس توالي ژن اختصاصي آن (CAGL0M05005g) از بانك اطلاعات ژنتيك كانديدا به دست آمد. جهت انجام Polymerase chain reaction (PCR)، پرايمرها و پروب مربوط توسط نرم‌افزار Oligo 7 طراحي گرديد. محصول PCR و پروب تحت دناتوراسيون و دماي اتصال بهينه قرار گرفت. سپس نانوذرات طلا به آن افزوده شد و تغيير رنگ محلول به صورت چشمي و با استفاده از اسپكتروفتومتر Ultraviolet-visible (UV-vis) و Transmission electron microscopy (TEM) بررسي گرديد. جهت بررسي حساسيت روش جديد، از محصول PCR با رقت‌هاي مختلف استفاده شد و نتايج با روش ژل الكتروفورز مقايسه گرديد. يافته‌ها: دماهاي بهينه‌ي اتصال پرايمر به DNA الگو و هيبريداسيون پروب تعيين گرديد. پس از افزودن نانوذرات طلا، رنگ محلول از قرمز به بنفش تغيير يافت و نتايج حاصل با استفاده از اسپكتروسكوپي و TEM تأييد شد. نتيجه‌گيري: نتايج نشان داد كه روش جديد يك روش سريع نسبت به روش‌هاي متداول و حساس نسبت به روش ژل الكتروفورز جهت شناسايي كانديدا گلابراتا مي‌باشد.