بررسي جهش‌هاي ژن frxA در سويه هاي هليكوباكترپيلوري مقاوم به مترونيدازول در شهرستان تبريز

Investigation of frxA gene mutations in metronidazole resistant Helicobacter pylori strains in Tabriz City

سابقه و هدف: با توجه به بالا بودن ميزان شيوع عفونت هليكوباكترپيلوري در كشور ما و شكست درماني آن، به علت شيوع مقاومت آنتي بيوتيكي اين باكتري، بررسي علل مقاومت هليكوباكترپيلوري نسبت به مترونيدازول و تاثير آن در روند درماني ضروري است. روش بررسي: از 275 بيمار مشكوك كه به بيمارستان امام رضا تبريز مراجعه كرده بودند، نمونه بيوپسي تهيه شد. بعد از تعيين هويت هليكوباكترپيلوري، سوسپانسيون باكتريايي معادل استاندارد 4 مك فارلند روي پليت­ها ريخته شد و سپس ديسك­هاي آنتي­بيوتيك مترونيدازول و نوارهاي Etest روي آن قرار داده شد. سويه­هاي مقاوم به مترونيدازول شناسايي شد و با روش PCR وقوع جهش در ژن frxA آنها رديابي شد. يافته­ها: از 112 سويه جداشده، 85 سويه مقاوم شناسايي شدند كه مقاومت به مترونيدازول در زنان (50%) بيشتر از مردان (35%) بود. در روش E-test، تعداد 70 (35/82%) سويه از 85 سويه مقاوم به مترونيدازول كه داراي MIC≥8 بودند يافت شد، ولي در روش DDA تعداد 88 سويه مقاوم يافت شد. از20 سويه تصادفي مقاوم به مترونيدازول، در 4 سويه موتاسيون در ژن frxA ثابت شد، ولي در سويه­هاي Susceptible موتاسيون تثبيت نشد. نتيجه­گيري: ميزان مقاومت هليكوباكترپيلوري به مترونيدازول در اين منطقه بالا است و شيوع مقاومت در خانم­ها بيشتر از آقايان است. يكي از مكانيسم­هاي مقاومت هليكوباكترپيلوري نسبت به مترونيدازول، وقوع جهش در ژن frxA است، ولي اين تنها عامل مقاومت به مترونيدازول نيست و ارزيابي ساير مكانيسم­هاي مولكولي مقاومت به مترونيدازول ضروري به نظر مي­رسد.

Background: Due to the high rate of Helicobacter pylori infection in our country and its treatment failure, and also because of the high prevalence of antibiotic resistance of this bacterium, evaluating causes of Helicobacter pylori resistance to metronidazole and its effect on the therapeutic course is necessary. Materials and methods: A biopsy sample was obtained from 275 suspected patients referred to Imam Reza Hospital in Tabriz. After identification of Helicobacter pylori, bacterial suspension (4 McFarland Standard) was poured onto plates and then antibiotic discs of metronidazole and E-test were placed on it. Metronidazole-resistant strains were detected and mutations in the frxA gene were detected by PCR. Results: Of 112 isolated strains, 85 resistant strains were identified. Resistance to metronidazole was more prevalent in women (50%) than males (35%). Of 85 resistant strains, 70 strains (82.35%) had MIC≥8 in the E-test; while in the DDA, 88 strains were resistant. Of the 20 randomly selected metronidazole-resistant strains, mutation was proved in the frxA gene in 4 strains, but mutagenesis was not proved in susceptible strains. Conclusion: Helicobacter pylori resistance to metronidazole is high in this area and the frequency of this resistance is higher in women than in men. One of the mechanism of resistance of Helicobacter pylori to metronidazole is the occurrence of a mutation in the frxA gene, but this mutation is not the only factor in developing resistance to metronidazole and the evaluation of other molecular mechanisms of resistance to metronidazole seems to be necessary.