بررسي خاصيت ايمني‌زايي آنتي ژن هاي انگل پاراآسكاريس اكوئوروم با استفاده از روش كانترايمنوالكتروفورز

Evaluation of the immunization effects of Parascaris equorum antigen by using of Counter immunoelectrophoresis method

مقدمه: پاراآسكاريس يكي از شايعترين عفونت ‌هاي نماتودي اسب در دنيا مي باشد. تهيه آنتي ژن يكي از كارهاي بنيادي در پي ريزي روش هاي تشخيصي سرولوژي و همچنين تهيه واكسن مي باشد. هدف از اين مطالعه بررسي خاصيت ايمني‌زايي آنتي ژن هاي انگل پاراآسكاريس اكوئوروم با استفاده از روش كانترايمنوالكتروفورز مي باشد. مواد و روشها: روده باريك اسب به صورت طولي باز شده و انگل جدا، جنس و گونه كرم بالغ جدا شده طبق اصول مورفولوژيك و مورفومتريك شناسايي و تمامي نمونه ها در دمايC°20- نگهداري شدند. كرم ها به روش خيساندن در محلول (Phosphate Buffered Saline) PBS ، به كمك هاون و در نهايت سونيكاسيون به فرم هموژن تبديل شدند. آنتي ژن ها در رقت هاي مختلف و به صورت مجزا و نيز به همراه ادجوانت به خرگوش تزريق و توليد آنتي بادي با استفاده از روش ايمنوالكتروفورز مورد بررسي قرار گرفتند. نتايج: ميزان تاثير آنتي ژن جدا شده از انگل پارا آسكاريس اكئوروم در توليد آنتي بادي نسبت به گروه كنترل منفي از لحاظ آماري معني دار بود. تزريق آنتي ژن به همراه ادجوانت موجب افزايش پاسخ ايمني مي شود. در اين مطالعه نشان داده شده است كه ميزان توليد آنتي بادي در خرگوش هايي كه 2 بار در هر 7 روز آنتي ژن دريافت كردند، بيشتر از آن هايي بود كه يكبار در هر 7 روز دريافت نموده اند. نتيجه گيري: آنتي ژن تام انگل كرمي پاراآسكاريس اكئوروم داراي خاصيت آنتي ژنيكي و تحريك كنندگي مي باشد و مي تواند به عنوان كانديدي جهت تهيه كيت هاي تشخيصي و همچنين توليد واكسن باشند.

Introduction: Parascaris equorum, is an important cosmopolitan nematode parasite of foals. The preparation of antigen is a basic practice to adjust a new sero-diagnostic method and also for produce vaccine. This study is aimed to evaluate the antigenic effects of Parascaris antigens by Counter immunoelectrophoresis (CIEP). Materials and Methods: In current work the intestine of the horses were longitudinally opened and the worm were collected. The genus and species of the worms were assessed by morphologic and morphometric techniques and stored in -20 ºC until to use. Worms were crushed in PBS method and then sonicated. Antigens in different concentrations alone or with adjuvant were injected to the rabbit and the production of Antibodies was analyzed by CIEP method. Results: The effect of antigen isolated from Parascaris equorum parasite in the production of antibodies was significantly in comparison with the negative control group. Also, indicated that production of antibody was increased by use of adjuvant with antigen. The productions of antibody in rabbits that receive antigen two times per a week were more than ones, which receive one time per a week. Conclusion: Total antigens of Parascaris equorum parasite is an anti-geneticaly and stimulating agent. These antigens could be a candidate for provision diagnostic kits and also for produce vaccine.