اثر پروتئين NS3 ويروس هپاتيت سي بر القاي بيان نشانگرهاي HSP70 و Glypican3 كارسينوماي هپاتوسلولار

Effects of hepatitis C virus NS3 protein on expression of heat shock protein 70 and Glypican3 as the markers of hepatocellular carcinoma

زمينه و هدف: عفونت ويروس هپاتيت C (HCV) يك عامل خطر مهم در ايجاد سرطان كبد است. پروتئين غيرساختاري 3 (NS3) ويروس HCV كه نقشي كليدي در چرخه زندگي ويروس ايفا مي‌كند، مي‌تواند بر فعاليت‌هاي طبيعي سلولي مانند: تكثير سلول، مرگ سلولي و مسيرهاي پيام رساني سلولي تأثير بگذارد همچنين شايد بتواند در ايجاد بدخيمي مؤثر باشد. از سوي ديگر دو ژن سلولي Heat Shock Protein 70 (HSP70) و Glypican3 (GPC3) كه در اين مطالعه ارزيابي مي‌شوند، نقش‌هاي مهمي در تنظيم مسيرهاي پيام‌رساني سلولي از جمله تكثير سلولي دارند. هدف از اين مطالعه، ارزيابي تأثير پروتئين HCV NS3 بر بيان اين دو ژن در مدل موش Balb / C بود. روش تحقيق: در اين مطالعه، سه گروه موش نر Balb / C (n=8) در نظر گرفته شد: گروه اول كه پلاسميد NS3 را دريافت كردند، گروه دوم كه پلاسميد HBx ويروس هپاتيت B را دريافت كردند و گروه كنترل منفي كه آب مقطر دريافت نمودند. دو تزريق از طريق وريد دم انجام شد و پس از آخرين تزريق، RNA از بافت كبد استخراج شد، سپس سنتز cDNA و Real Time PCR براي ژن‌هاي مربوطه صورت گرفت. يافته‌ها: نتايج نشان داد كه بيان نسبي ژن‌هاي انتخاب شده در گروه NS3 در مقايسه با گروه كنترل منفي معني‌دار بود. (براي ژن GPC3، 0/0229=P و براي ژن HSP70، 0/0020=P) امّا تفاوت معني‌داري بين گروه NS3 در مقايسه با گروه HBx وجود نداشت (براي ژن GPC3، 0/4516=P و براي ژن HSP70، 0/6740=p). نتيجه‌گيري: نتايج به‌دست آمده نشان داد كه NS3 شايد بر افزايش بيان ژن‌هاي ذكر شده مؤثر باشد؛ امّا براي فهم دقيق‌تر، مطالعات بسيار بيشتري بايد انجام شود؛ مانند: ارزيابي تأثير NS3 بر ساير پروتئين‌هاي درگير در مسيرهاي پيام‌رساني سلولي، مطالعه ساير دومين‌هاي NS3، انجام آزمايش‌هاي پاتولوژيك و بافت شناسي، تغيير روش‌هاي آزمايش، ارزيابي نقش NS4A به عنوان يك فاكتور براي NS3 و استفاده از وكتورهايي با پايداري بيشتر.

Background and Aims: Hepatitis C virus (HCV) infection is an important risk factor for the development of liver cancer. The HCV NS3 protein plays a key role in the virus life cycle and can affect normal cellular activities, such as cell proliferation, cell death, and cell signaling pathways. Moreover, it may influence malignancy development. Two cellular genes, heat shock protein 70 (HSP70) and Glypican3 (GPC3), that are assessed in this study, play important roles in the regulation of the cell signaling pathways, including cell proliferation. This study aimed to evaluate the effects of HCV NS3 protein on the expressions of these two genes in the Balb/C mouse model. Materials and Methods: This study was performed on three groups of male mice of Balb/C (n=8). The first group received NS3 plasmid, the second group received hepatitis B virus HBx plasmid, and the negative control group received distilled water. Two injections were administered via the tail vein, and after the last injection, RNA was extracted from the liver tissue. Next, the cDNA synthesis and real-time polymerase chain reaction for relevant genes were performed. Results: Findings revealed that the relative expression of the selected genes in the NS3 group was significant in comparison with the negative control group (P=0.0229 for GPC3 and 0.0020 for HSP70). However, there was no significant difference between the NS3 group and the HBx group (P=0.4516 for GPC3 and 0.6740 for HSP70). Conclusion: Results showed that NS3 protein may affect the increasing expression of the mentioned genes. Nevertheless, for more precise understanding, much more studies should be performed, such as evaluation of the effect of NS3 on other involved proteins in cell signaling pathways, studying other domains of NS3, performance of pathological and histological tests, usage of various experimental methods, assessment of the role of NS4A as a cofactor for NS3, and usage of vectors with more stability.