جداسازي و شناسائي مولكولي قارچ‌هاي آلوده‌كننده جيره بر پايه سويا و ذرت طيور در منطقه بيرجند

Isolation and molecular identification of fungal contamination of corn and soybean diets of poultry in Birjand area

به منظور توليد غذاي ســالم براي مصرف‌كنندگان، شناخت و كنترل عوامل آلوده‌كننده خوراك دام اجتناب‌ناپذير است. از دو نوع خوراك طيور، تعداد 212 نمونه جمع‌آوري شد. بعد از آماده‌سازي نمونه‌ها رقت‌هاي متوالي تهيه گرديد و از هر رقت روي محيط كشت غذائي حاوي آگار كشت داده شد. از خوراك دان‌هاي مرغي منطقه بيرجند خراسان جنوبي آرايه‌هاي قارچي P. chrysogenum ، P. aurantiogriseum و Penicillium sp. ،Aspergillus flavus و Fusarium proliferatum جداسازي، خالص‌سازي و بر اساس خصوصيات ريخت‌شناسي و مولكولي شناسائي شدند. استخراج DNA ژنومي با استفاده از روش تغيير يافته Chelex 100 و از واكنش زنجيره‌اي پليمراز براي تكثير بخشي از ناحيه rDNA آرايه‌هاي قارچي استفاده شد. جدايه‌هاي Rhizopus بر اساس خصوصيات ريخت شناسي شناسائي شدند. بيشترين و كمترين تعداد پرگنه‌هاي قارچي مربوط به قارچ پني‌سيليوم (16/1 ±17/0) و قارچ فوزاريوم (417/0 ±075/0) بود. بر اساس يافته‌هاي اين پژوهش، كنترل آلودگي خوراك دان به اين قارچ‌ها در برنامه‌هاي مديريت بهداشت غذائي با روش‌هاي كنترل محيط انبار و روش‌هاي بيولوژيك توصيه مي‌شود.

Fungal growth on poultry feed decreases their nutritional value and constitutes health hazard. To produce healthy food for consumers, recognizing and controlling the contamination of poultry feed is necessary. A total of 212 poultry feed samples including two different feeds were collected and by using dilution plating technique, successive dilutions were prepared and each of dilutions was cultured on solid fungal media cultures. Different fungal species such as Penicillium sp., P.aurantiogriseum, P.chrysogenum, Aspergillus flavus and Fusarium proliferatum were isolated from poultry feed of Birjand area of south Khorasan province and then purified and identified based on morphological and molecular characteristics. DNA extraction were performed by modified Chelex 100 method and Polymerase chain reaction (PCR) method using amplification of internal transcribed spacer (ITS) region used for molecular identification of fungal taxa. Rhizopus isolates identified based on morphological features. The highest and lowest fungal colonies were Penicillium(0.617±1.16) and Fusarium (0.075±0.417) receptively. Based on this study, controlling the contamination of poultry feed is recommended.