كلونينگ و بيان ژن اورات اكسيداز استرپتومايسس جدا شده از دريا در باكتري اشريشياكلي اوريگامي

زمينه و هدف: استرپتومايسس‌ها باكتري‌هاي رشته‌اي گرم مثبت و هوازي هستند كه از منابع متفاوت جدا مي‌شوند. اين باكتري‌ها توانايي توليد متابوليت‌هاي ثانويه و مواد فعال بيولوژيكي را دارند و از اين جهت در زمينه بيوكنترل بسيار حائز اهميت هستند. اورات اكسيداز يكي از فراورده‌هاي آنزيمي ميكروبي است كه از منابع مختلفي از جمله استرپتومايسس قابل استخراج است. اين مطالعه به منظور كلونينگ و بيان ژن اورات اكسيداز استرپتومايسس جدا شده از دريا در باكتري اشريشياكلي اوريگامي انجام شد. روش بررسي: در اين مطالعه توصيفي تعداد 60 نمونه آب و رسوب از اعماق متفاوت سواحل درياي خزر در استان مازندران جمع‌آوري گرديد. آزمون‌هاي رنگ آميزي گرم، متيل رد،VP، سيترات، هيدروليز نشاسته، هيدروليز كازئين، احيا نيترات، اكسيداز وكاتالاز براي تعيين هويت و جداسازي استرپتومايسس دريا انجام شد. ژن اورات اكسيداز توسط روش كلونينگ TA با استفاده از وكتور PTG19 در درون ميزبان اشريشياكلي اوراگامي كلون گرديد. بيان ژن كلون شده در كلني‌هاي نوتركيب توسط روش Real time PCR بررسي شد. با استفاده از نرم‌افزارهاي clustalX و Mega5درخت فيلوژني رسم گرديد. يافته‌ها: غربالگري نمونه‌هاي آب دريا 12 ايزوله استرپتومايسس را شناسايي كرد كه همگي داراي ژن اورات اكسيداز بودند. بيان ژن اورات اكسيداز در اشريشياكلي اوريگامي توسط روش RealTima PCR به اثبات رسيد. نتـايج بررسي‌هاي فيلوژنتيكي، برخي خويشاوندان نزديك استرپتومايسس را به عنوان كانديد مطالعات بعدي معرفي نمود. نتيجه‌گيري: باكتري استرپتومايسس مي‌تواند به عنوان منبع غني از متابوليت‌هاي ثانويه با كاربردهاي فراوان مورد توجه قرار گيرد و به عنوان سويه‌اي بومي به منظور توليد آنزيم اورات اكسيداز به كار رود. با به كار بردن ميزبان‌هاي كلونينگ مختلف و بررسي شرايط بهينه توليد، اين سويه مي‌تواند نامزد مطالعات آينده به منظور ساخت داروها و تركيبات ضدميكروبي باشد.