انتقال ژن epsps به نخود به منظور مقاومت به علفكش گلايفوسيت

نخود (Cicer arietinum) در رقابت با علف‌هاي هرز بسيار حساس بوده و دچار كاهش عملكرد و كيفيت محصول مي‌شود. لذا توليد گياهان مقاوم به علف‌كش‌هاي عمومي نظير گلايفوسيت مفيد مي‌باشد. در اين تحقيق، ازAgrobacterium tumefaciens سويه LBA4404 حاوي پلاسميد pBI121 و ژن موتاسيون يافته epsps براي ايجاد مقاومت به علف‌كش گلايفوسيت استفاده شد كه در آن ژن nptII به‌ عنوان گزينشگر تحت پيش‌بر 35S قرار گرفته است. به‌منظور انتقال ژن از محورهاي جنيني نخود رقم ثمين و بيونيج استفاده شد. ريزنمونه ها پس از هم‌كشتي با سوسپانسيون باكتري به مدت سه روز در محيط هم‌كشتي B5 قرار گرفت و پس از آن به‌منظور باززايي به محيط كشت MS به همراه غلظت مناسبي از هورمون‌هاي BAP، Kin و NAA منتقل گرديد. درنهايت پس از گزينش‌هاي متوالي با استفاده از آنتي بيوتيك كانامايسين، ريشه‌زايي و استقرار گياهان T0 در محيط هيدروپونيك انجام شد و با استفاده از آزمون PCR، در 15گياه ژن اختصاصي epsps و ژن nptII تكثير و تراريختگي آنها تأييد شد. عدم آلودگي گياهان مشكوك به تراريخته با استفاده از آغازگرهاي نواحي ITS باكتري و همچنين با بررسي بيان ژن مورد نظر با استفاده از آزمون RT-PCR تأييد شد و درصد تراريختگي در اين بررسي 0.75 درصد بود.