ارزيابي بيان موقت ژن هاي AS1 و 4’CGT در ﮔﻠﺒﺮگ‌ﻫﺎي بنفشه آفريقايي ﺑﺎ سيستم اﮔﺮواﯾﻨﻔﯿﻠﺘﺮﯾﺸﻦ جهت توليد رنگ جديد در گل

توليد ارقام زينتي با رنگ ‌هاي جديد هدف اصلي در صنعت گل و گياهان زينتي است. بنفشه آفريقايي از لحاظ تجاري به خوبي شناخته شده و در رنگ‌هاي مختلفي به جز گل زرد موجود است. اين پژوهش با هدف تغيير رنگ گلبرگ‌هاي بنفشه آفريقايي و توليد مسير بيوسنتزي رنگدانه آئورون از طريق دست‌ورزي ژنتيكي ژنهاي AS1 و 4’CGT انجام شد. بدين منظور‌، اين ژن‌ها با استفاده از PCR با آغازگرهاي اختصاصي از گلبرگ گل ميمون زرد جداسازي و بترتيب در ناقل بياني pCAMBIA1304 وpBI121 اتصال گرديد. پلاسميدهاي نوتركيب4’CGT +pBI121 وAS1 ‌pCAMBIA1304+ با استفاده از بررسي‌هاي Colony PCR، هضم آنزيم، توالي‌يابي و هم‌رديف سازي آن‌ها در بانك اطلاعاتي، مورد تاييد قرار گرفت. سپس به روش الكتروپوريشن به آگروباكتريوم سويه LBA4404 منتقل و با استفاده از سيستم بيان موقت در گلبرگ‌هاي گياه بنفشه آفريقايي مورد بررسي قرار گرفت. در اين سيستم سوسپانسيون آگروباكتريوم حامل سازه‌ ژني با استفاده از سرنگ در پايه گلبرگ‌ها تزريق شد. نتايج مورفولوژيكي پس از 3 روز به وضوح تغيير رنگ گلبرگ‌هاي سفيد به زرد كم رنگ را نشان داد و هيچ تغييري در گلبرگ‌هاي شاهد مشاهده نشد. آناليزPCR و مشاهده با ميكروسكوپ نوري بترتيب بيان ژن وتغييرات فنوتيپي را تاييد كردند. همچنين آئوروسيدين-6-او- گلوكزيد (AOG) با استفاده از HPLC-DAD-MSn در گلبرگ‌هاي تراريخت شناسايي شد. با بكارگيري اين سيستم مي‌توان سازه ژني را با اعتماد بيشتري براي تراريختگي دائم به گياهان زينتي انتقال داد. همچنين اين پژوهش مي‌تواند راهي را براي مهندسي ايجاد رنگ زرد در گونه‌هاي گياهان زينتي كه فاقد اين نوع رنگ هستند باز نمايد.