عنوان مقاله :
فعاليت ضد قارچي اسموتين توتون بيان شده در Escherichia coli عليه برخي قارچ هاي بيماريزاي گياهي
پديد آورندگان :
عليزاده تيلكي ، علي پژوهشگاه ملي مهندسي ژنتيك و زيست فناوري - پژوهشكده زيست فناوري كشاورزي - گروه زيست فناوري مولكولي گياهي , مطلبي ، مصطفي پژوهشگاه ملي مهندسي ژنتيك و زيست فناوري - پژوهشكده زيست فناوري كشاورزي - گروه زيست فناوري مولكولي گياهي , مقدسي جهرمي ، زهرا پژوهشگاه ملي مهندسي ژنتيك و زيست فناوري - پژوهشكده زيست فناوري كشاورزي - گروه زيست فناوري مولكولي گياهي , جورابچي ، عصمت پژوهشگاه ملي مهندسي ژنتيك و زيست فناوري - پژوهشكده زيست فناوري كشاورزي - گروه زيست فناوري مولكولي گياهي
كليدواژه :
اسموتين , PR پروتئين , بيان پروكاريوتي , قارچ , پروتئين نوتركيب
چكيده فارسي :
هدف از اين تحقيق ارزيابي فعاليت ضد قارچي اسموتين در برابر چندين بيمارگر قارچي مهم گياهي شامل مي شد. به منظور انجام اين مطالعه، ژن اسموتين از گياه تنباكو (Nicotiana tabacum) در باكتري(Rosetta DE3) Escherichia coli همسانه سازي و بيان گرديد. به منظور بهينهسازي شرايط بيان پروتئين، از آزمون تاگوچي استفاده شد. آزمون وسترن بلات بيان پروتئين نوتركيب را مورد تأييد قرار داد. بررسيها نشان داد پروتئين نوتركيب بيان شده عمدتاً به شكل نامحلول اينكلوژن بادي در سلول انباشته ميشود؛ لذا پس از محلول ساختن اين تودهها با كمك مواد احيا كننده شرايط ايجاد ساختمان طبيعي تأمين شد. اثر اسموتين نوتركيب بر قارچهاي Rhizoctonia solani، Botrytis cinerea، Sclerotinia sclerotiorum، Fusarium oxysporum، Verticillium dahleae و Alternaria brassicola مورد بررسي قرار گرفته و فعاليت پروتئين خالص شده از طريق سه آزمون ضدقارچي متفاوت Radial Diffusion، Disk Diffusion و Spore Germination ارزيابي و مشاهده شد كه اين پروتئين رشد قارچهاي فوق را مهار ميكند. همچنين آزمون هموليتيك خوني نشان داد كه اين پروتئين براي سلولهاي پستانداران فاقد سميت مي باشد. يافتههاي فوق نشان مي دهد كه ژن اسموتين گياه تنباكو داراي توانايي قابل توجهي در مهار رشد قارچ هاي بيماريزا گياهي مي باشد. همچنين اين ژن مي تواند درتوليد گياهان تراريخته مقاوم به قارچهاي بيماريزا مورد استفاده قرار گيرد.
عنوان نشريه :
پژوهش هاي كاربردي در گياه پزشكي
عنوان نشريه :
پژوهش هاي كاربردي در گياه پزشكي