مطالعه فراساختاري و ايمنوهيستوشيميايي مخچه نوزاد رت در اثر مسموميت با جيوه آلي

Ultrastructural and immunohistochemical study of cerebellum with methylmercury chlorid poisoning in newborn rat

جيوه آلي (متيل مركوري كلرايد) يك آلوده كننده محيطي و به عنوان يك ماده سمي براي بافت هاي عصبي بويژه در مراحل تكامل و توسعه سيستم عصبي است. غلظت هاي پايين متيل مركوري كلرايد مي تواند از راه جفت به جنين و در نوزادان تازه به دنيا آمده از طريق شير مادر منتقل شود. هدف از اين مطالعه ارزيابي تغييرات فراساختاري در هايپوكامپ نوزادان رت در سن 25 روزگي بعد از تولدشان بود . به رت‌هاي ماده بالغ نژاد ويستار در روز 12،13و14آبستني ماده سمي متيل مركوري كلرايد با دز هاي 5/،5/4و10 ميلي گرم به ازاي هر كيلو گرم وزن بدن تزريق شد. نوزادان تازه بدنيا آمده تا سن 25 روزگي در كنار مادرشان نگهداري و سپس آسان كشي شده و نمونه برداري از مخچه به منظور مطالعات ميكروسكوپ نوري و الكتروني با فيكس كردن نمونه ها در فرمالين بافر 10 درصد و گلوتر آلدهيد 2 درصد انجام گرفت. علايم باليني و رفتار هاي حركتي در رت‌هاي نوزاد هر روز بررسي شد، اما هيچ تغييري مشاهده نگرديد. در بررسي هاي ميكروسكوپي، كاهش جمعيت سلولهاي لايه گرانولار و آپوپتوز سلول هاي عصبي لايه گرانولار مخچه كه در رنگ آميزي تانل نيز به اثبات رسيد، درگروه هاي تيمار تحت مطالعه مشاهده شد. اجزاي سلولي مخچه نوزاد رت نر در گروه هاي 5/0 ،5/4و 10 چندين تغيير فرا ساختاري، شامل مهاجرت كروماتين به حواشي هسته، اتساع شبكه آندوپلاسميك صاف و جدا شدن ريبوزوم ها از شبكه آندوپلاسمي خشن را نشان دادند. ميتوكندري ها تورم كريستا هاي دروني و فشرده شدن ماتريكس را نشان دادند. مشاهدات مورفومتري و مورفولوژي در اين بررسي ثابت كرد كه سلول هاي لايه گرانولار مخچه نوزاد رت تحت تاثير متيل مركوري كلرايد قرار گرفته اند. بنابراين مواجه شدن با دز هاي پايين متيل مركوري كلرايد موجب كاهش جمعيت نروني در ناحيه گرانولار مخچه مي شود.

Methylmercury (MeHg) is a well- known environment pollutant toxic to the nervous tissue, particularly during development. At a low concentration Methylmercury chloride (MMC) can be transferred to the fetus through the placenta and to newborn offspring through breast milk. The purpose of this study were to evaluate ultrastructural alteration in the cerebellum of newborn rat on the 25th postnatal days. Adult Female wistar rats were inoculated with MMC (0.5,4.5, 10mg/kg /Hg/day) on the 12th, 13th and 14th gestational days. The newborn offspring were placed with the mothers until postnatal day 25. Newborn rats were observed for clinical signs and motor behavior daily. No changes were observed in the clinical signs and motor behavior of these animals. Half of cerebellum were fixed with 2.5% gluteraldehyde in 0.1 M phosphate buffer and routinely processed for electron microscopy and another samples of cerebellum fixed in formalin buffer 10% solution and processing for paraffin section light microscopy and TUNEL assay test. The component cells of the cerebellum male offspring in the 0.5 , 4.5 , 10 mg /kg groups showed reduction of granular cells layer and apoptosis in neuron cells. ultrastructural study showed chromatin migration to the edge of nuclei, dilation of the smooth endoplasmic reticulum, ribosomes to shed from the surface of RER. Mitochondria were rounded with condensed matrical spaces and expanded intercristal space.and the matrix was condensed. Our observation confirm that MMC induces neuronal injury and apoptosis in cerebellum