بررسي ويروس موزاييك معمولي لوبيا (BCMV) در چند استان كشور و واكنش سه ژنوتيپ لوبيا به آن

Study of Bean Common Mosaic Virus (BCMV) in Several Provinces and Reaction of Three Bean Genotypes to BCMV Infection

طي دو فصل زراعي 1383 و 1384 تعداد 260 نمونه برگ لوبيا با علايم موزاييك، رگبرگ نواري و قاشقي شدن برگ ها از مزارع استان‌هاي فارس، كهگيلويه و بوير احمد، اصفهان و تهران جمع آوري گرديد. با انجام آزمون سرولوژيكيELISA با استفاده از آنتي سرم BCMV آلودگي 110 نمونه به اين ويروس تاييد گرديد. واكنش سه ژنوتيپ ks-21478 (لوبيا چيتي)، ks-31170 (لوبيا قرمز) و ks-41235 (لوبيا سفيد) نسبت به BCMV با مايه زني آنها با جدايه BCMV فارس مورد بررسي قرار گرفت. 15-10 روز پس از مايه زني، بوته ها با استفاده از آزمون ELISA مورد بررسي قرار گرفتند. نتايج به دست آمده بيانگر 4/65% آلودگي در ژنوتيپ چيتي، 1/58% آلودگي در ژنوتيپ قرمز و 6/3% آلودگي در ژنوتيپ سفيد بود. از ژنوتيپ‌هاي لوبيا قرمز و چيتي مايه زني شده، تعداد 25 گياه و از ژنوتيپ لوبيا سفيد تعداد 35 گياه انتخاب شده در آزمون RT-PCR و IC-RT-PCR با استفاده از آغازگـرهاي اختصاصي BCMV، مورد آزمايش قرار گرفتند. نتايج بيانگر تكثير قطعه اي به طول 890 جفت باز، در گياهان اليزا مثبت ژنوتيپ‌هاي قرمز و چيتي و تعداد محدودي از گياهان اليزا منفي بود. نتيجه آزمون RT-PCR و IC-RT-PCR در 25 بوته از ژنوتيپ لوبيا سفيد كه فاقد علايم بوده و نتايج آزمون اليزا در مورد آنها منفي بود، نيز مثبت ارزيابي گرديد. بذور بوته‌هاي لوبيايي كه در شرايط گلخانه آلوده شده بودند جمع آوري و در شرايط گلخانه مجدداً كشت شدند. بوته‌هاي حاصل از كاشت بذور ژنوتيپ‌هاي چيتي، قرمز و سفيد در مرحله دو برگي جهت تعيين ميزان بذرزاد شدن BCMV با استفاده از آزمون‌هاي DAS-ELISA و IC-RT-PCR مـورد بررسي قـرار گرفتند. ميزان انتقـال بـا بذر در ژنوتيپ‌هاي چيتـي (ks-21478) قرمز (ks-31170)و سفيد (ks-41235) به ترتيب 3/78، 8/79 و 9/54 درصد برآورد گرديد.

In 2004 and 2005 growing seasons, 260 bean leaf samples with mosaic, vein-banding, and leaf-rolling symptoms were collected from bean fields of Fars, Kohgiluye va Boyer-Ahmad, Isfahan and Tehran provinces. ELISA test (DAS-ELISA and Indirect-ELISA), using BCMV antiserum, confirmed infection of 110 samples to BCMV. A selected isolate of BCMV from Fars province was inoculated on three bean genotypes (butter bean ks-21478, kidney bean ks-31170 and navy bean ks-41235). Ten to fifteen days after inoculation, plants were tested for the presence of virus by ELISA (DAS-ELISA and Indirect-ELISA). According to the results, the percentages of infected plants to BCMV were 65.4% for butter bean genotype, 58.1% for kidney bean genotype and 3.6% for navy bean genotype. The twenty five inoculated plants of each butter bean and kidney bean genotypes and the thirty five inoculated plants of navy bean genotype were tested by RT-PCR and IC-RT-PCR using specific primers of BCMV. Based on results, the amplification of an 890 bp fragment was detected in ELISA positive of butter bean and kidney bean genotypes as well as some ELISA negative plants. The twenty five symptomless and ELISA negative plants of navy bean genotype had also positive amplification in RT-PCR and IC-RT-PCR tests. To determine the rate of seed transmission in the three genotypes, infected bean plants were maintained in greenhouse until seed production and the seeds were harvested and planted. The plants which grew from these seeds were analyzed at two-leaf stages for the presence of BCMV using DAS-ELISA and IC-RT-PCR. The seed transmission rates in butter bean (ks-21478), kidney bean (ks-31170) and navy bean (ks-41235) genotypes were 78.3%, 79.8% and 54.9%, respectively.