مطالعه تنوع سويه‌اي اكينوكوكوس گرانولوزوس در چرخه اهلي انگل با تكثير ژن nda-1 به روش PCR-RFLP

Study on Echinococcus granulosus genotype diversity in domestic cycle using nucleotide sequence of nda-1 gene

اين مطالعه براي تعيين ژنوتيپ‌هاي اكينوكوكوس گرانولوزوس در نشخواركنندگان استان آذربايجان غربي انجام شد. به اين منظور اندام‌هاي آلوده به كيست هيداتيد كبد، ريه، قلب، كليه و طحال از 270 راس گوسفند، 185 راس بز، 197 راس گاو و 129 راس گاوميش آلوده به كيست هيداتيد از نقاط مختلف استان جمع‌آوري شدند. تعداد كيست‌ها و بارور بودن آن‌ها در هر عضو به تفكيك دام تعيين شدند. يكصد و چهارده راس دام آلوده به كيست‌هاي بارور شناسايي شدند و استخراج DNA از پرتواسكولكس انجام شد. به منظور شناسايي تنوع سويه‌اي، تكثير ژن NADH دهيدروژناز 1 (nad-1) به روش PCR انجام شد و محصولات PCR با استفاده از آنزيم HaeIII به روش RFLP مورد ارزيابي قرار گرفتند. يافته‌هاي مولكولي بر اساس توالي نوكليوتيدي ژن nad-1 نشان داد تمامي نمونه‌هاي با منشاي نشخواركنندگان و سگ (ميزبان اصلي) الگوي RFLP مشابه داشتند كه متعلق به ژنوتيپ سويه گوسفندي (G1) بودند. نتايج اين مطالعه نشان داد در اين منطقه حداقل يك ژنوتيپ از انگل حضور دارد.

The present investigation was undertaken to determine the presence of Echinococcus granulosus genotypes in livestock animals in West Azerbaijan province, Iran. The infected Liver, lung, heart, kidney and spleen samples from 270 sheeps, 185 goats, 197 cattle and 129 water buffalos were obtained from different parts of the region. The number and the fertility of hydatid cysts were determined. A number of 114 samples of animals with fertile hydatid cysts and eight samples of dogs were detected and DNA from protoscolexs were extracted. For parasite strain identification, mitochondrial NADH subunit 1 (nad-1) gene was amplified by polymerase chain reaction (PCR) and the PCR products were subjected to restriction fragment length polymorphism (RFLP) using HaeIII enzyme. All animals and dogs investigated based on nad-1 gene showed the same RFLP pattern for this gene that belonged to G1 genotype (common sheep strain). Results confirmed the high prevalence of E. granulosus infection in animals in north-west of Iran and also revealed the presence of at least one parasite genotype in this region.