بهينه سازي شرايط القا و تثبيت كشت ريشه‌هاي مويين گياه كاسني (Cichorium intybus) حاصل از تلقيح آگروباكتريوم رايزوژنز (Agrobacterium rhizogenes)

Agrobacterium rhizogenes induced hairy roots gain of the potential of production and accumulation of plant secondary metabolites. In recent decades, many researchers have focused on the biosynthesis o

ريشه‌ها‌ي مويين حاصل از تلقيح آگروباكتريوم رايزوژنز از قابليت سنتز و تجمع متابوليت‌هاي ثانويه گياهي برخوردار مي‌باشند. در دو دهه‌ي اخير توجه قابل ملاحظه‌اي به سنتز تركيبات ثانويه ارزشمند در ريشه‌هاي مويين معطوف شده است، زيرا ريشه‌هاي تغيير يافته ژنتيكي برخلاف سوسپانسيون سلولي، متابوليت‌هاي ثانويه را با ثبات ژنتيكي و بيوسنتزي بيشتري توليد مي‌كنند. كاسني (Cichorium intybus L.) گياهي دارويي، دو ساله يا پايا و متعلق به تيره گل ستاره‌اي‌ها (Asteraceae) است. اين گياه حاوي تركيبات دارويي بسيار مهمي از جمله اينولين، اسكولين، تركيبات فرار، كومارين، فلاونوييدها و ويتامين‌ها است. در اين تحقيق به منظور بهينه‌سازي شرايط كشت ريشه مويين، كوتيلدون‌هاي گياه كاسني با سويه‌هاي مختلف باكتري آگروباكتريوم رايزوژنز تلقيح و بر روي سه محيط كشت گياهي مختلف كشت شدند. تعداد ريشه‌هاي توليد شده در تيمارهاي مختلف محيط كشت ثبت گرديد و تاييد ريشه‌هاي مويين با استفاده از واكنش PCR براي تكثير اختصاصي ژن‌هاي rolBوrolC انجام شد. بر اساس شدت ريشه‌زايي حاصل از سويه‌هاي آگروباكتريوم در محيط كشت‌هاي مختلف، بهترين سويه آگروباكتريوم به همراه محيط كشت بهينه جهت تثبيت كشت ريشه‌هاي مويين كاسني تعيين گرديدند. سويه‌هاي A4، A13 و 15834 موفق به القاي ريشه مويين در گياه كاسني شدند و محيط كشت MS به عنوان مناسب‌ترين محيط كشت به منظور القاي ريشه‌هاي مويين و تثبيت كشت آنها معرفي گرديد.

Agrobacterium rhizogenes induced hairy roots gain of the potential of production and accumulation of plant secondary metabolites. In recent decades, many researchers have focused on the biosynthesis of valuable secondary metabolites in hairy roots, because genetically modified roots produce such compounds with more genetic and biosynthetic stability than cell suspension cultures. Chicory (Cichorium intybus L.) is a biennial or perennial medicinal plant from Asteraceae. The plant contains many important metabolites including inulin, scoline, coumarin, vitamins, flavonoids and aromatics. In this study, with the aim of optimizing hairy root culture establishment, cotyledons of Chicory plants inoculated with different strains of Agrobacterium rhizogenes were cultured on different plant tissue culture media. Numbers of hairy roots produced in different experiments were recorded and molecular confirmation of hairy root clones was performed through specific amplification of rolB and rolC genes in PCR reactions. Based on the efficiency of hairy root induction in different experiments, the best combination of bacterial strain-culture medium for establishing hairy root cultures of Chicory were determined. Agrobacterium rhizogenes strains A4, A13 and 15834 induced hairy roots in Chicory and MS medium was considered as the best culture medium for developing and establishment of hairy root cultures.