جستجوي ويروس بلوتانگ در شتر‌هاي يك كوهانه‎ي كشتار شده در نجف‌آباد (مركز ايران) با روش RT-PCR

Genomic Detection of Blue tongue Virus in Dromedary Camels Slaughtered in Najafabad (Center of Iran) by RT-PCR Method

بيماري زبان آبي يك بيماري ويروسي غيرواگير در نشخواركنندگان به ويژه گوسفند است كه با فراواني كمتر در گاو، بز، بوفالو، آهو، شتر و آنتلوپ‌ها ديده مي‌شود. عمدتاً توسط حشرات منتقل مي‌شود و باعث ضايعاتي در مخاط بيني، دهان و اندام‌هاي حركتي مي شود. همچنين گزارشاتي مبني بر ايجاد سقط در برخي حيوانات وجود دارد. شتر يكي از حيواناتي است كه مخزن اين ويروس است ولي علايمي نشان نمي‌دهد. از اين رو مي‌تواند باعث انتشار عفونت در مناطق مختلف و حيوانات ديگر شود. هدف از اين مطالعه، جستجوي ژنومي ويروس بلوتانگ در شتر‌هاي يك كوهانه ي كشتار شده در مركز ايران بود. به منظور جستجوي توالي قطعه ژنومي S7 در ويروس زبان آبي، از تعداد 110 شتر يك كوهانه‎ي كشتار شده در كشتار گاه نجف آباد نمونه‎ي خون، تهيه شد. جهت جلوگيري از انعقاد، به نمونه‌ها‎ي خون هپارين اضافه شد و در يك محفظه در كنار يخ به آزمايشگاه ارسال گرديد. با استفاده از روش اسيد گوانيديم- ايزوتيوسيانات و فنل-كلروفرم استخراج RNA انجام پذيرفت. سپس نمونه‎ها به روش RT-PCR مورد آزمون قرار گرفت. محصول PCR حاصل از آزمون، روي ژل آگاروز 5/1 درصد برده شد و پس از رنگ آميزي با اتيديوم برومايد، توسط ژل داكيومنت قرايت گرديد. نتايج آزمون نشان داد كه كليه نمونه‌ها منفي هستند كه خوشبختانه مي‌تواند گوياي آن باشد كه اين عفونت در منطقه ي مورد بررسي از كشورمان وجود ندارد و يا متعاقب عفونت گذرا، ويرس بلوتانگ در خون شتر يك كوهانه پايداري طولاني مدت ندارد. با توجه به اينكه اين بيماري در برخي استان‌هاي ديگر گزارش شده بهتر است مطالعات بيشتري در خصوص آلودگي شتر صورت پذيرد.

Blue tongue disease is a non-contagious, viral disease of ruminants, mainly sheep and less frequently cattle, goats, buffalo, deer, dromedaries and antelope. That is mainly transmitted by insects and cause lesion in the mouth, nasal mucosa, and limb, also existing reports of create abortion in some animals. Camel might be reservoir of BTV without showing of any clinical sings so it can be spread the virus among other regions and animals. The objective of this study was genomic detection of bluetongue virus in one humped camels slaughtered in central part of Iran. In order to detection of S7 sequence of bluetongue virus genome in 110 one humped camels that slaughtered in Najafabad abattoir, specimens were prepared. For preservation of coagulation heparin was added to blood samples and they transported to laboratory in cool box. RNA was extracted by acid guanidinium-isothiocyanat and phenol chloroform method and they were detected by reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR). All PCR products were separated by 1.5% agarose gels electrophoresis and stained with ethidium bromide. After that, they were analyzed by using gel documentation. The results of tests showed that all of samples were negative. Fortunately, it shows that in this studied area in our country, this infectious cannot be exist or transient infection in camel does not persist for a long time. As BTV infection was reported in some provinces, we highly recommend to expand study on camel infection with BTV.