جداسازي و شناسايي مولكولي باكتري هاي مقاوم به نيكل و كادميوم از پساب هاي صنعتي استان گيلان

Isolation and molecular identification of nickel and cadmium resistant bacteria from Guilan industrial wastewater

نيكل و كادميوم از جمله فلزات سنگين و سمي هستند كه استفاده هاي صنعتي از آن ها سبب آلودگي گسترده محيط زيست شده است. يكي از بهترين راهكارها جهت حذف اين فلزات سمي، استفاده از باكتري هاي مقاوم به اين فلزات مي باشد. بنابراين تشخيص باكتري هاي مقاوم به فلزات سمي، اولين گام در فرآيند پاك سازي زيستي است. بنابراين تصفيه بيولوژيكي پساب هاي صنعتي،به عنوان گزينه اي اقتصادي و سازگار با محيط زيست بسيار مورد توجه است. به منظور جداسازي و شناسايي باكتري هاي مقاوم به نيكل و كادميوم نمونه گيري از پساب هشت كارخانه در شمال كشور انجام شد. چندين جدايه هاي باكتريايي در محيط LB agar حاوي حداقل غلظت فلزات سنگين نيكل(gr/plate 002/0) و كادميوم به ميزان (?g/plate5/2) جدا شدند. جدايه هاي مقاوم اوليه كه به حداكثر غلظت نيكل ( gr/plate2/0) و كادميوم (?g/plate20) نيز مقاومت بودند مجدداً جدا شدند. پس از بررسي هاي ميكروسكوپي، شناسايي مولكولي باكتري ها از طريق 16s rDNA PCR Sequencing انجام شد. در مجموع هفده گونه يا سويه مختلف از جمله Staphylococcus epidermidis ، Staphylococcus pasteuri ، sp Planococcus ، Brevundimonas diminuta ، Bacillus licheniformis ، Pseudomonas sp، Exiguobacterium sp ، Micrococcus sp ، Comamonas sp،Delftia sp ، Chryseobacterium sp ، Serratia sp ، Acinetobacter sp شناسايي شدند كه بيشترين مقاومت به اين دو فلز را نشان مي دادند.

Nickel and Cadmium are among the heavy and toxic metals whose industrial usage lead to environment pollution extensively. One of the best procedures in removing of the toxic minerals in nature is using metal resistant bacteria. Therefore, determining the bacteria resistant to the toxic minerals is the first step in usage of them in bioremediation. In result industrial wastewater bioremediation is highly regarded as an economical and environmentally friendly option. In order to isolation and identification of resistant bacteria to nickel and cadmium, sampling was performed from wastewater in eight factories in the north of Iran (Guilan). Several bacterial isolates were separated on LB agar medium containing minimal concentrations of heavy metals, nickel (0.002 gr / plate) and cadmium levels (2.5 ?g / plate). The primary metal resistant isolates that showed maximum resistance, nickel (0.2 gr / plate) and cadmium (20 ?g / plate), were also separated. After microscopic examination, molecular identification of bacteria was performed by 16S rDNA PCR Sequencing. A total, 17 different species were identified which includes Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus pasteuri, Planococcus spp., Brevundimonas diminuta, Bacillus licheniformis, Pseudomonas spp., Exiguobacterium spp., Micrococcus spp., Comamonas spp., Delftia spp., Chryseobacterium spp. Serratia spp., Acinetobacter spp. that showed the highest resistance to nickel (0.2 gr / plate) and cadmium (20 ?g / plate).