بررسي ساختار ايمونوژنيسيته پروتيين نو تركيب HIV به دست آمده از ويروس gp41-p24

Evaluation the immunogenesity structure of HIV recombinant protein gp41-p24

سابقه و هدف: پروتيينهاي نوتركيب به دست آمده از ويروس HIV مي‌توانند به عنوان يك ايمونوژن و تحريك‌كننده سيستم ايمني باشند. از مهمترين آنها مي‌توان به پروتيينهاي داخلي (gag) و سطحي ويروس (Env) اشاره كرد. در اين تحقيق به بررسي ساختار ايمونوژنيسيته پروتيين نوتركيب gp41-p24 به دست آمده از ويروس HIV مي‌پردازيم. روش بررسي: در مطالعه تجربي حاضر، پروتيين نوتركيب gp41-p24 كه قبلا توسط روشهاي كلونينگ تهيه گرديده و به حالتUnfold نگهداري مي‌شد با روشهاي رقيق‌سازي پروتيين از حالت Unfoldبه حالت Refold در آمد. وزن مولكولي و غلظت پروتيينها با روشهاي الكتروفورز و اسپكتروفتومتري اندازه‌گيري شد. Refoldingپروتيين با استفاده ازالكتروفرز با ژل Native و دستگاه (Circular Dichroism) CD براساس تغيرات ساختار دوم پروتيين ارزيابي شد. فعاليت ايمني و ساختار ايمونوژنيسيته اين دو پروتيين با استفاده از تست الايزا و وسترن بلات بر اساس نوع پروتيين و ميزان جذب نوري (OD) ثبت شد. يافته ها: نتايج نشان داد كه وزن مولكولي اين دو پروتيين 32 كيلودالتون مي‌باشد و از خلوص كامل برخوردارند. Refoldingپروتيين از طريق ژل Native مشاهده شد. در اين پروتيين افزايش ساختارهاي Helix و Beta و كاهش ساختار Random (درمقايسه با پروتيينUnfold ) پديدارگرديد. همچنين واكنش ايمني در پروتيين استاندارد و Refoldشده با آنتي‌بادهاي موجود در سرم بيماران كنترل مثبتHIV مشاهده گرديد و با استفاده ازآناليز واريانس يكطرفه اختلاف معني‌داري برحسب نوع پروتيين مشاهده نشد. نتيجه گيري: تحقيقات نشان داد كه پروتيين نوتركيب gp41-p24 به دست آمده از ويروس HIV بعد از Refolding داراي فعاليت ايمونوژني مي‌باشد و از آن مي‌توان به عنوان يك ايمونوژن در ايمونيزاسيون و تحريك سيستم ايمني استفاده كرد.