مطالعه مولكولي آلودگي به Ehrlichia canis در سگ‌هاي ترومبوسيتوپنيك

Molecular study on Ehrlichia canis in thrombocytopenic dogs

زمينه مطالعه:‌ ‌آلودگي به Ehrlichia canis كه يك باكتري گرم منفي داخل سلولي اجباري با پراكندگي جهاني است منجر به ايجاد ارليشيوز مـونـوسيتـي سـگ سـانـان مي‌شود. هدف: هدف از انجام اين مطالعه بررسي شيوع آلودگي E. canis در سگهاي ترومبوسيتوپنيك با استفاده از روش‌nested PCR و ارزيابي نقش تشخيصي ترومبوسيتوپني در اين آلودگي است. روش كار:‌ ‌چهل نمونه خون جمع آوري شده از سگ‌هاي ارجاعي به بيمارستان آموزشي دامهاي كوچك دانشگاه تهران، بر اساس تعداد پلاكتهايشان در سه گروه تقسيم بندي شدند: گروه الف (ترومبوسيتوپنيك:) تعداد پلاكت زير Lµ/100000 (11 نمونه)، گروه ب (ترومبوسيتوپنيك:) تعداد پلاكت بين Lµ/200000-101000 (15 نمونه) و گروه ج (طبيعي:) تعداد پلاكـت بيـش از Lµ/201000 (14 نمونه.) سپس به روش nested PCR با استفاده از آغازگر اختصاصي گونه‌اي مورد بررسي قرار گرفتند. نتايج:‌ ‌قطعه‌اي از ژن S rRNA16 ارليشيا كنيس در پنج نمونه از گروه الف (5/45)%، سه نمونه از گروه ب (20)% و يك نمونه از گروه ج (1/7)% نمايان شد. شيوع ارليشيا كنيس در گروه الف بطور معني‌داري بيشتر از ساير گروه‌ها بود (02/0‌p=‌.) در مجموع تقريباً يك سوم از سگ‌هاي ترومبوسيتوپنيك داراي آلودگي قابل تشخيص به E. canis بودند (7/30.)%‌ ‌نتيجه گيري نهايي:‌ ‌نتايج اين مطالعه نشان مي‌دهد كه ترومبوسيتوپني براي تشخيص آلودگي E.canis اختصاصي نيست و نبايد به تنهايي براي تاييد تشخيص ارليشيوز سگ سانان بكار رود ولي مي‌تواند بعنوان تست غربالگري پيش از ساير تست‌هاي تشخيصي تكميلي مورد استفاده قرار گيرد.

BACKGROUND: Infection with Ehrlichia canis, a gram negative obligatory intracellular bacterium, causes canine monocytic ehrlichiosis which is the worldwide disease in dogs. OBJECTIVES: The objective of this study was to investigate the prevalence of E. canis in thrombocytopenic dogs using nested PCR and diagnostic role of thrombocytopenia in the infection. METHODS: Blood samples collected from 40 dogs attended in Teaching small animal hospital of Tehran University were classified as group A (platelet counts below 101.000/µL, thrombocytopenic, n=11), B (101.000-200.000/µL, thrombocytopenic, n=15) and C (platelet counts more than 201.000/µL, non-thrombocytopenic, n=14) according to their platelet counts. 16S rRNA was analyzed by nested PCR using specific primers. RESULTS: 16S rRNA gene fragment of E. canis were detected in five samples of group A (45.5%), three samples of group B (20%), and one sample of group C (7.1%). Prevalence rate of infection was statistically higher in group A than the other groups (p=0.02). In total, approximately one third of thrombocytopenic dogs had demonstrable E. canis infection (30.7%). CONCLUSIONS: while thrombocytopenia cannot be considered as specific marker for detection of E. canis infection, it can be used as a surveillance test prior to other diagnostic methods