بررسي بيان ژن‏هاي CHit1 و CHit2 در قارچ‏ Beauveria bassiana هنگام تعامل پارازيتي با تريپس پياز،Thrips tabaci (Thys.: Thripidae)

Study on the gene expression of Chit1 and Chit2 in Beauveria bassiana during the parasitic interaction with onion thrips, Thrips tabaci (Thys.: Thripidae)

برهم‌كنش پاتوژن- ‌ميزبان فرايندي بسيار پيچيده است. همانند بسياري از قارچ‏هاي پاتوژن حشرات، Beauveria bassiana آنزيم‏هايي توليد مي‏كند كه در زمان آلودگي براي نفوذ به داخل بدن ميزبان، كوتيكول را از بين مي‏برند. كيتينازها آنزيم‏هاي مهمي براي هيدروليز كيتين به‌شمار مي‏روند و مي‏توانند نقش مهمي در كنترل بيولوژيك آفات مختلف، ازجمله تريپس پياز، Thrips tabaci Lind.، ايفا نمايند. در اين پژوهش، آغازگرهاي خاص براي ژن‏هاي CHit1 و CHit2 طراحي شد و الگوي بيان اين دو ژن در استرين IRAN 789C قارچ B. bassiana در سه غلظت 104، 105 و 106 كنيدي در ميلي‏ليتر قبل و بعد از تعامل پارازيتي با لاروهاي سن دوم تريپس پياز با استفاده از روش RT-PCR بررسي گرديد. در همه‌ي برهم‏كنش‏ها، بيان ژن‏هاي مورد نظر بعد از تعامل پارازيتي انجام شد و با افزايش غلظت كنيدي‏هاي قارچ، ميزان بيان ژن نيز افزايش يافت. بيان اين ژن‏ها در هنگام تعامل پارازيتي قارچ با لاروها بيانگر حايز اهميت بودن كيتينازها به‌عنوان فاكتوري موثر در كنترل بيولوژيك ارگانيسم‏هاي هدف مي‏باشد.

The host-pathogen interaction is a very complex process. Like many entomopathogenic fungi during infection process, Beauveria bassiana produces enzymes which are able to destroy the cuticle of insects in order to penetrate into the host. Chitinases are considered to be the important enzymes for the hydrolysis of chitin and play an important role in the biological control of various pests including onion thrips, Thrips tabaci Lind. In the present study, specific primers for CHit1 and CHit2 genes were designed to study the expression pattern of these two chitinases from B. bassiana IRAN 789C strain before and after interaction with the second instar larvae of onion thrips using RT-PCR. Larval inoculation was carried out using three concentrations, 104, 105 and 106 conidia per ml. The results showed that both genes were expressed in all conidial concentrations, after parasitic interaction. Increasing the conidial concentration of B. bassiana caused the upregulation of chitinases expression level. Expression of these genes during the parasitic interaction of the fungus and insect larvae reflects the importance of chitinases gene as an effective factor in biological control of target organisms.