بررسي رابطه بين ميزان تحرك و رنگ‌آميزي حياتي با واكنش اسپرم‌هاي منجمد گاوي به آزمايش هيپواسموتيك

Determination of relationship between motility rate and vital staining with reaction of frozen-thawed bull sperm to hypoosmotic swelling test

ارزيابي اسپرم‌هاي منجمد گاوي به منظور ارزيابي ميزان باروري اسپرم‌ها از ارزش بالايي برخوردار است. هدف از اين مطالعه بررسي رابطه بين ميزان تحرك و ميزان واكنش اسپرم‌ها به رنگ‌آميزي حياتي با ميزان واكنش اسپرم‌هاي منجمد به محلول‌هاي رقيق شده هيپواسمول و يافتن بهترين رقت محلول هيپواسمول براي ارزيابي غشا پلاسمايي اسپرم‌هاي منجمد گاوي است. در اين مطالعه ضمن بررسي ميزان تحرك اسپرم‌ها و تعداد اسپرم‌هاي زنده از آب مقطر و محلول‌هاي دكستروز- نمكي و نمكي با رقت‌هاي 50، 75، 100 و 300 ميلي‌اسمول به منظور ارزيابي غشا پلاسمايي اسپرم‌ها استفاده گرديد. براي اين آزمايش، تعداد 30 عدد پايوت اسپرم منجمد گاو نژاد هلشتاين خريداري و آزمايش‌هاي رنگ‌آميزي ساختاري جوهر هندي، رنگ‌آميزي حياتي، ميزان تحرك و آزمايش تورم هيپواسموتيك روي آنها انجام گرديد. نتايج حاصله نشان مي‌دهد كه ميزان نسبت اسپرم‌هاي منجمد واكنش داده به آب مقطر اختلاف معني‌داري با رقت‌هاي ديگر داشت و تفاوت معني‌داري بين نسبت اسپرم‌هاي واكنش داده به محلول‌هاي رقيق شده و محلول‌هاي ايزو اسمول 300 ميلي‌اسمول مشاهده گرديد. اما اختلاف معني‌داري بين محلول‌هاي رقيق شده مشاهده نشد، اما نسبت اسپرم‌هاي واكنش داده به محلول دكستروز- نمكي رقيق شده 50 ميلي‌اسمول از ديگر محلول‌هاي رقيق شده بيشتر بود. بنابراين براي بررسي وضعيت غشا پلاسمايي اسپرم‌هاي منجمد مي‌توان از آب مقطر و از محلول رقيق شده 50 ميلي‌اسمول دكستروز- نمكي استفاده نمود. همچنين نتايج نشان مي‌دهد كه ارتباط مثبت و معني‌داري بين درصد تحرك و ميزان پاسخ اسپرم‌ها به محلول‌هاي هيپواسمول وجود دارد اما ارتباط معني‌داري بين تعداد اسپرم‌هاي زنده و تعداد اسپرم‌هاي واكنش داده به محلول‌هاي هيپواسمول وجود ندارد بنابراين مي‌توان بيان داشت كه آزمايش هاي تعيين درصد تحرك و هيپواسموتيك براي ارزيابي اسپرم‌هاي منجمد ارزشمند مي‌باشند.

Evaluation of bull frozen-thawed spermatozoa is valuable to determination of fertility rate. The objective of this study was to determination of relationship between motility and vital staining with reaction rate of frozen-thawed bull sperm to hypoosmol solutions and determination of the best medium and dilution for evaluation of plasma membrane of bull frozen sperm. In this study we have examined the motility and lived sperms rate, we have used of distilled water, dextrose-NaCl and NaCl medium with 50, 75, 100 and 300 mOsm/L dilutions. For the present study we have bought 30 Holestian bull frozen-thawed sperm payote. The examinations of Indian ink, vital staining, motility and hypoosmotic test were used to evaluate the payotes. The results have showed that proportion of reacted sperm to DW more than other solutions (p < 0.05). Proportion of reacted sperm to hypoosmol solutions were more than isoosmol solution (p < 0.05). proportion of reacted sperm to 50 mOsmol/L of dextrose-NaCl was more than other hypoosmol solutions with no significant differences (p > 0.05). In conclusion, this study demonstrated that distilled water can efficiently use for evaluation of the functional integrity of the plasma membrane of frozen–thawed bull sperm and 50 mOsmol/L of dextrose-NaCl was a good hypoosmotic media to evaluate plasma membrane of frozen sperm. Based on the results, the positive correlation was observed between motility and hypoosmotic Swelling test but no correlation between hypoosmotic Swelling test and lived sperm rates. So, motility and hypoosmotic Swelling test are valuable examinations for evaluation of bull frozen-thawed sperms.