بررسي الگوي مقاومت آنتي بيوتيكي و تشخيص فنوتيپي آنزيم هاي بتالاكتاماز وسيع الطيف سويه هاي كلبسيلا پنومونيه

Study of Antibiotic Resistance Pattern and Phenotypic Detection of ESBLs in Klebsiella Pneumoniae

مقدمه و هدف: ازجمله مكانيسمهاي مقاومت آنتي بيوتيكي در باكتري هاي گرم منفي به خصوص سويه كلبسيلا پنومونيه، توليد آنزيمهاي بتالاكتاماز وسيع الطيف (Extended –Spectrum B lactamase ;ESBLs) است. ژن هاي كدكننده ESBLs معمولاً روي پلاسميد قرار گرفته اند و قابليت انتقال به سويه هاي گرم منفي ديگر را نيز دارند. به دليل اهميت موارد فوق، شناخت الگوي مقاومت و حساسيت آن نسبت به آنتي بيوتيك هاي -B لاكتام هدف اين مطالعه قرار گرفت. روش كار: براي انجام اين مطالعه توصيفي - تحليلي، نمونه هاي مختلف كلينيكي بيمارستانهاي بروجرد و همدان در طي مدت 6 ماه جمع آوري و با تستهاي بيوشيميايي و كيت انتروسيستم تعيين هويت شدند. جهت تاييد سويه ها از ژن Ure D به عنوان ژن داخلي سويه كلبسيلا پنومونيه به روش PCR استفاده شد. بررسي مقاومت آنتي بيوتيكي با روش ديسك ديفيوژن انجام شد. براي بررسي وجود ESBLs از روش(Phenotypic Confirmatory Test) PCT استفاده گرديد و حداقل غلظت مهار كنندگي (MIC Minimal inhibitor concentration;) آنتي بيوتيكهاي سفتازيديم و ايمي پنم به روش E- test انجام شد. نتايج: : بيشترين ميزان مقاومت سويه هاي كلبسيلا پنومونيه مربوط به آنتي بيوتيكهاي سفكسيم 7/46%، سفترياكسون 3/43%، آزترونام 3/43%، سفوتاكسيم 7/41%، كوتريماكسازول 8/40%، سفتازيديم 7/36% و كمترين مقاومت مربوط به آنتي بيوتيكهاي ايمي پنم 0%، سپيروفلوكساسين7/16% ، سفپيم 25% و جنتاميسين 7/26% بود. بشترين تعداد سويه هاي كلبسيلا پنومونيه ايزوله شده از نمونه ادرار 72سويه (60%) و كمترين تعداد از ترشحات چشم 1 مورد (8/0%) جداسازي شدند. 56 سويه 7/46% به‌عنوان سويه ESBLs مثبت شناخته شدند. با استفاده از نوار E- test براي آنتي بيوتيك سفتازيديم 66 سويه مقاوم 10 سويه نيمه حساس و 44 سويه حساس شدند و با روش E- test براي آنتي بيوتيك ايمي پنم120 سويه حساس شدند. نتيجه نهايي: شيوع بالاي مقاومت آنتي بيوتيكي و توليد ESBLs درمناطق مورد مطالعه، نشان دهنده نياز به غربالگري نمونه هاي كلينيكي از نظر ESBLs توسط آزمايشگاه و استفاده از آنتي بيوتيكهاي مناسب با قدرت ممانعت كنندگي بتالاكتامازي و آنتي بيوتيك ها به صورت تركيب با كلاولانيك توسط پزشكان مي باشد.

Introduction & Objective: One of the mechanisms of antibiotic resistance in gram negative bac-teria, particularly Klebsiella pneumonia strains, is the production of Extended-Spectrum B lactamase enzymes (ESBLs). Encoding genes of ESBLs are usually located on the plasmid and they are able to transfer to other gram-negative bacteria. Thus, due to the importance of resistance pattern recognition and its sensitivity to the B- lactam antibiotics, the above men-tioned issue was examined in this study. Materials & Methods: In this study different clinical samples of Boroujerd and Hamadan Hos-pitals during 6 months were collected and identified by biochemical tests and Enterosystem kit. To confirm the strains, the Ure D gene was used as the internal gene of Klebsiella pneumoniae by PCR method. Antibiotic resistance by Disk diffusion method was performed. Phenotypic confirmatory test was used to determine the presence of ESBLs. MIC antibiotics of Ceftazidime and imipenem by E test method were determined. Results: The results showed that the highest rate of Klebsiella pneumoniae strains resistance was related to Cefexime antibiotics 46.7%, Ceftriaxone 43.3%, Azthrunam 43.3%, Cefotaxime 41.7%, Cotrimaksazol 40.8% , Ceftazidim 36.7% and the least resistance was related to antibiotics Imipenem 0% Sprofluksasin 16.7%, Cefepime 25% and Gentamicin 26.7%. 56 strains( 46.7%) were identified as ESBL –positive strains. Using E-test strip for Ceftazidim antibiotic, 66 strains were resistant , 10 strains intermediate ,and 44 strains were sensitive to Ceftazidim and by E test method for Imipenem antibiotic ,120 strains were sensitive. Conclusion: The high prevalence of antibiotic resistance and ESBLs production in the cities which were studied indicates the need for screening of ESBLs in clinical samples by labora-tory and prescribing appropriate antibiotics with B-lactamase inhibitory power and antibiotics together with clavulanic by physicians. (Sci J Hamadan Univ Med Sci 2014; 20 (4):295-302)