كلونينگ و بيان پروتيين M2 ويروس آنفلوانزا H1N1 در باكتري Ecoli سويه BL21(DE3)

Cloning and Expression of Influenza H1N1 virus M2 protein in BL21 (DE3

سابقه و هدف: ويروس انفلوانزا A يكي از عوامل اصلي مرگ ومير ساليانه مي باشد و از سال 1960 ميلادي بر عليه آن واكسن موثر در دسترس بوده است. تغييرات مداوم آنتي ژنيك ويروس چالش بزرگي در مسير توليد ساليانه واكسن مي باشد. در حال حاضر محققين روي آنتي ژنهاي ثابت ويروس مطالعه مي كنند. پروتيينM2 يك كانال يوني درون پوشش ويروس انفلوانزاي A تشكيل مي دهد كه در عفونت زايي آن موثر است. اين پروتيين حفاظت شده است و هدف مناسبي براي توليد واكسن انفلوانزا ميباشد. مواد و روش ها: با توجه به محدوديت كشت ويروس انفلوانزا در آزمايشگاه توالي ژن M2 از ويروس سويه H1N1 ايران انتخاب و سنتز شد. ژن M2 در وكتور pET22b ساب كلون گرديد. پروتيين نوتركيب در باكتري E.coli سويه BL21DE3 بيان و از آنتي بادي اختصاصي در روش SDS-PAGE و وسترن بلات براي تاييد آن استفاده شد. يافته ها: غلظت پروتيين حاصل 300 ميكروگرم در هر ميلي ليتر بدست آمد و با آنتي بادي اختصاصي تاييد گرديد. نتيجه گيري: پروتيين M2 ويروس آنفلوانزا در باكتري Ecoli سويه BL21 (DE3) قابل بيان است

Aim and Background: Influenza A is a major cause of mortality in a year. There has been an efficient vaccine available against it since 1960. Antigenic variation is a preventive agent for yearly vaccine production. Now researchers focus on the constant antigens of viruses. M2 protein makes an ionic channel in the coat of influenza, a virus that is effective on infection by virus. This protein is conserved and it is considered as a proper candidate vaccine for influenza infection. Materials and Methods: Due to limitations for influenza virus culture at the lab, the sequence of influenza virus H1N1 strain of Iran was synthesized. It was sub-cloned into pET22b vector recombinant protein and expressed in BL21 E.coli and confirmed with specific antibody by SDS-PAGE and western blot techniques. Results: The concentration of recombinant M2 protein was 300?g/ml confirmed by specific antibody. Conclusion: Influenza M2 protein could be expressed in BL21 E.coli host.