بررسي فراواني ژن‌هاي بتالاكتاماز PER و VEB در اسينتوباكتر بوماني ايزوله شده از بيماران شهر تهران به روش مولكولي PCR

Prevalence PER and VEB beta-lactamase Genes among Acinetobacter baumannii Isolated from Patients in Tehran by PCR

زمينه و اهداف: با توجه به اهميت گزارش‌هاي فراوان از عفونت‌هاي ناشي از اسينتوباكتر بوماني مولد بتالاكتامازهاي وسيع الطيف در سال‌هاي اخير در كشورمان، اين مطالعه باهدف تعيين مقاومت پادزيستي و تعيين فراواني ژنهاي كد كننده ي بتالاكتامازهاي PERو VEB در ايزوله ي اسينتوباكتر بوماني از بيماران بيمارستان هاي تهران با روش PCR انجام شد. مواد و روش كار: 100 ايزوله ي باليني اسينتوباكتر بوماني جمع آوري شده از بيمارستان هاي مختلف شهر تهران طي يك سال، با استفاده از محيط هاي كشت اختصاصي و تست هاي بيوشيميايي شناسايي شدند. آنتي بيوگرام با 11 پادزيست مختلف با روش انتشار ديسك (Disk diffusion) بر اساس دستورالعمل CLIS انجام شد. در مرحله ي بعد MIC پادزيست هاي سفي پيم و سفتازيديم انجام و جهت شناسايي سويه هاي مولد ESBL روش ديسك تركيبي مورد استفاده قرار گرفت. در نهايت براي بررسي شيوع ژنهاي بتالاكتاماز PERو VEB با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي،PCR انجام گرديد. يافته‌ها: نتايج آنتي بيوگرام نشان داد كه بيشترين مقاومت به ترتيب مربوط به پادزيست هاي آميكاسين و سفي پيم و كمترين مقاومت مربوط به پادزيست پلي ميكسين B بود. ميزان مقاومت چند دارويي در اين سويه ها حدود 70% و از مجموع ايزوله هاي مورد مطالعه حداقل غلظت بازدارنده نسبت به سفتازيديم در 84% از نمونه ها?g/ml 128MIC? و نسبت به سفي پيم در 91% از نمونه ها ?g/ml 128 MIC? بود. برطبق نتايج آزمون ديسك تركيبي نيز20% سويه ها مولد آنزيم بتالاكتاماز وسيع الطيف بودند. نتايج PCR جهت شناسايي سويه هاي حاوي ژن هاي مقاومت نشان داد كه ژن هاي PER و VEB به ترتيب 47% و32% است. نتيجه‌گيري: با توجه به اينكه ژنهاي PER و VEB در اين باكتري شناسايي شده و امكان انتقال آنها به ديگر باكتريها وجود دارد، لذا توصيه مي گردد در الگو مصرف آنتي بيوتيك ها تجديد نظر گردد و به معيارهاي كنترل عفونت‌هاي بيمارستاني توجه بيشتر شود.

Background and Aim: According to numerous reports of infections caused by spectrum beta lactamases (ESBLs) producing Acinetobacter baumannii in our country in recent years, this study was performed to define the antibiotic susceptibility patterns and detect the prevalence PER and VEB beta-lactamase genes among A.baumannii isolated from patients in Tehran by PCR. Materials and Methods: 100 A.baumannii clinical isolates collected from various hospitals in Tehran during a year, using special culture media and biochemical tests were identified. The antibiograms of the isolates against 11 antibiotics by disk diffusion method (Disk diffusion) according to Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) guidelines was performed. Then minimum inhibitory concentrations (MIC) was determined for cefepime and ceftazidime and for the identification of ESBL-producing strains was used in combination disk method, and finally to assess the prevalence of PER and VEB beta-lactamase genes using specific primers PCR was performed. Results: Antibiograms results showed that the greatest resistance to the antibiotics amikacin, cefepime, and less resistance to polymyxin B were obtained. Rates of multi-drug resistant strains of about 70% was achieved. Of the isolates studied, the MIC of ceftazidime in 84% and for cefepime in 91% were ? 128 ?g/ml. The results of the combined-disk test demonstrated that 20% of samples were ESBL positive. The PCR results showed that 47% and 32% of our isolates had PER and VEB genes respectively. Conclusions: Regarding to existence of PER and VEB genes in this bacterium and possibility of transformation of these genes to the other bacteria, reconsideration in antibiotics consumption patterns and more attention to nosocomial infections control criteria are inevitable.