شيوع ژن بتالاكتاماز TEM-1 در سويه‎هاي باليني پسودوموناس آيروژينوزاي جدا شده از عفونت‎هاي سوختگي توسط روش PCR دوگانه- شهركرد 1387-1386

Prevalence of TEM-1 type beta-lactmase genes in Pseudomonas aeruginosa strains isolated from burn infections using Duplex PCR in Shahrekord, 2008

چكيده زمينه و هدف: حضور ژن هاي بتالاكتاماز وسيع الطيف نقش مهمي در ايجاد مقاومت سويه‎هاي مولد اين آنزيم‌ها به آنتي بيوتيك‌هاي بتا لاكتام ايفا مي‎كنند. مقاومت باكتري‌هاي گرم منفي از جمله پسودوموناس آيروژينوزا نسبت به آنتي بيوتيك‌هاي مختلف، به خصوص بتا لاكتام و كرباپنم به طور روزافزون گزارش شده است. اين مطالعه با هدف بررسي شيوع ژن بتا لاكتالاز TEM-1 در ايزوله‌هاي پسودوموناس آيروژينوزا توسط روش PCR دوگانه انجام گرديد. مواد و روش‌ها: در اين بررسي توصيفي- تحليلي، 175 ايزوله باكتري پسودوموناس آيروژينوزا كه از بيماران سوختگي بستري در بخش سوختگي جمع‌آوري شده بود، مورد بررسي باكتريولوژيك قرار گرفت. نمونه‌ها بر طبق روش‎هاي استاندارد، كشت و شناسايي گرديدند. سپس، فراواني سويه‌هاي توليدكننده بتالاكتامازهاي وسيع الطيف، با روش Combined Disk تعيين گرديد. DNA با روش جوشانيدن استخراج شده و از نظر وجود ژن TEM-1 توسط روش PCR دو گانه مورد بررسي قرار گرفت. يافته ها: در اين مطالعه، از مجموع 175 ايزوله پسودوموناس آيروژينوزا، در 66 ايزوله(7/37 درصد) فتوتيپ بتالاكتاماز وسيع الطيف مثبت مشاهده شد. كه از اين تعداد، 15/15 درصد داراي ژن مقاومت بتالاكتاماز TEM-1 بودند. نتيجه گيري: با توجه به شيوع رو به افزايش سويه‎هاي توليد كننده بتا لاكتامازهاي وسيع الطيف، استفاده از پروتكل درماني مناسب بر اساس تعيين الگوي آنتي بيوگرام سويه‎ها، قوياً توصيه مي‎شود. واژگان كليدي: بتالاكتاماز وسيع الطيف، پسودوموناس آيروژينوزا، TEM-1

Abstract Background: Existence of extended spectrum B-lactamase (ESBL) genes plays an important role in spreading B-lactam antibiotic resistance in the producing strains of these enzymes. The resistance of gram-negative bacteria, such as Pseudomonas aeruginosa, to different antimicrobial agents, especially B-lactam and carbapenem, has increasingly been reported. This study was conducted to determine the prevalence of TEM-1 beta-lactamases in Pseudomonas aeruginosa isolates through Duplex PCR. Materials and Methods: In this descriptive-analytic study, 175 Pseudomonas aeruginosa isolates collected from burn patients were subjected to bacteriological tests. The samples were cultured and identified according to standard methods. Then the frequency of ESBL producing strains was determined via the combined disk method. Using boiling method, DNA was extracted and examined for the existence of TEM-1 gene by Duplex PCR. Results: Out of the 175 Pseudomonas aeruginosa isolates, 66 (37.7%) were ESBL positive, 15.15% of which were positive for TEM-1 B-lactamases resistance gene. Conclusion: Noticing the increasing rate of the ESBLs producing strains, using the appropriate treatment protocol based on the antibiogram pattern of the strains is highly recommended. Keywords: Extended-spectrum B-lactamases, ESBL, Pseudomonas aeruginosa, TEM-1