ارزيابي گياه تراريخت كلزاي بيان كننده پروتئين نوتركيب از زير واحد B سم هاي STX2 و CTX باكتري هاي اشريشيا كلاي و ويبريوكلرا

بيماري هاي اسهالي يكي از مهمترين معضلات بهداشت جهاني، در تمامي رده هاي سني مطرح مي باشند. از ميان عوامل ايجاد كننده اين بيماري ها مي-توان به Enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC) وVibrio cholerae اشاره كرد. در گروه EHEC سروتايپ O157:H7، شايع ترين عامل ايجاد اسهال، از طريق سم STX2 ايجاد بيماري مي كند. در ويبريوكلرا نيز توكسين CTX منجر به بروز بيماري مي گردد. هر دوي اين سموم داراي ساختار AB5 هستند. با توجه به غير سمي بودن زيرواحد B و ايمني زايي ذاتي اين زيرواحد، مي توان آن را كانديداي مناسبي براي ايجاد ايمني عليه اين سموم معرفي كرد. بذور گياهان رآكتور زيستي مناسبي براي توليد ايمونوژن هاي نوتركيب محسوب شده و پروتئين هاي بيگانه اي كه در گياه بيان مي شوند مي توانند ساختار اصلي خود را حفظ مي كنند. در اين تحقيق بيان پروتئين نوتركيب متشكل از زيرواحد اتصالي دو سم كلرا و STX2 با ترجيح كدوني گياه به عنوان كانديداي يك ايمونوژن خوراكي در بذر بررسي شد. بدين منظور قطعه ژني sc (stx2B و ctxB) به ناقل بياني گياهي تحت كنترل پيش برنده اختصاصي بذر كلزا FAE (Fatty Acid Elongase) منتقل و پس از تائيد حضور سازه ژني با روش هاي مولكولي، به اگروباكتريوم تومي فاشينس جهت تراريختي گياه انتقال و جهت بيان پروتئين به گياه كلزا منتقل شد. پس از تاييد تراريختي، ميزان بيان گياهي پروتئين نوتركيب در بذر به روش الايزا ارزيابي و ميزان پروتئين حدود 40 ميلي گرم در يك گرم بذر تخمين زده شد. نتايج اين تحقيق بيانگر كارايي بالاي استفاده از بذر براي توليد پروتئين نوتركيب مي باشد.