مقاومت به فلوركينولون ها و موتاسيون ژن gyrA در جدايه هاي باليني كلبسيلا پنومونيه

Fluoroquinolone resistance and mutation in gyrA gene in clinical isolates of Klebsiella pnemoniae

زمينه و اهداف: مقاومت باكتري هاي گرم منفي به فلوركينولون ها اغلب درنتيجه موتاسيون كروموزومي و جابجايي اسيدهاي آمينه خاصي در ژن هاي gyr و par مي باشد. در مطالعه حاضر مقاومت كلبسيلا پنومونيه هاي جداشده از عفونت ادراري به آنتي بيوتيك هاي فلوركينولوني و موتاسيون هاي ژن gyrA در جدايه هاي مقاوم به سيپروفلوكساسين بررسي گرديد. مواد و روش كار: در سال 1393، مقاومت 46 جدايه كلبسيلا پنومونيه به فلوركينولون با روش انتشار از ديسك و MIC سيپروفلوكساسين، به روش براث ماكرودايلوشن تعيين گرديد. موتاسيون در ناحيه تعيين كننده مقاومت به كينولون ها در ژن gyrA كلبسيلا پنومونيه هاي مقاوم، از طريق تكثير اين ژن در واكنش PCR و بررسي توالي نوكلئوتيدي محصول بررسي گرديد. يافته ها: از 46 جدايه مورد بررسي، تعداد 10 جدايه (21/7%) مقاوم به فلوركينولون ها بودند. ميزان MIC سيپروفلوكساسين در اين جدايه ها از 64 تا 2048 ميكروگرم بر ميلي ليتر متغير بود. در 8 جدايه از 10 جدايه مقاوم، موتاسيون منجر به جابجايي اسيدهاي آمينه مشاهده گرديد. در 6 جدايه در كدون شماره 87 موتاسيون منجر به جايگزيني آلانين و آسپارژين به جاي آسپارتيك اسيد گرديد. همچنين در يك مورد در كدون شماره 83 جايگزيني سرين به ايزولوسين مشاهده گرديد. نتيجه گيري: نتايج به دست آمده نشان مي دهد جهش در ژن gyrA يكي از مهم ترين مكانيسم هاي مقاومت به سيپروفلوكساسين در جدايه هاي باليني كلبسيلا پنومونيه در رشت مي باشد.

Background and Aim: Fluoroquinolone resistance has been mainly associated with mutation in gyr and par genes bacteria and specific amino acids alteration in gram negative bacteria. In the present study, urinary tract infection isolates of Klebsiella pneumonia were investigated for fluoroquinolone resistance and mutation patterns of gyrA gene in ciprofloxacin resistant isolates. Materials and Methods: In 2014, Susceptibility to fluoroquinolones in 46 isolates of K. pneumoniae was tested by the disc diffusion method whereas broth macrodilution method was used to investigate ciprofloxacin minimum inhibitory concentration. Mutations in the quinolone resistancedetermining regions (QRDR) was investigated in chromosomal gyrA gene in quinoloneresistant K. pnemoniae isolates, by PCR amplification of gyrA gene and sequencing. Results: Out of 46 tested bacteria, ten (21.7%) isolates recognized as fluoroquinolones resistant. Minimum inhibitory concentration of ciprofloxacin for resistant isolates ranged between 64 to 2048 µg/mL. In gyrA gene sequence analyses, 8 (80%) isolates had an amino acid substitution. In six isolates mutation occurred in Asp87 that amino acid alters with Alanine and asparagine. Also Ser83Ile substitution was found in one isolate. Conclusions: The obtained results demonstrated that gyrA mutation is one of the most important mechanisms of resistance to ciprofloxacin in clinical isolates of K. pneumonia in Rasht.