اثرات نسبت هاي مختلف رقيق‌سازي و غلظت هاي مختلف دي متيل سولفوكسايد، متانول و اتيلن گليكول روي پارامترهاي حركتي اسپرم هاي انجمادزدايي شده فيل ماهي (Huso huso)

Effect of dilution rates and different concentration of dimethyl sulphoxide, methanol and ethylene glycol on motility parameters of Beluga (Huso huso) post-thawed sperm

انجماد اسپرم به‌عنوان روشي موثر در جلوگيري از انقراض نسل گونه هاي در معرض خطر مي‌باشد. هدف از اين پژوهش، بررسي اثر حفاظتي مواد محافظ سرمايي در غلظت هاي مختلف و تاثير نسبت‌هاي مختلف رقيق‌سازي روي درصد و زمان تحرك اسپرم ها پس از انجمادزدايي بود. براي اين كار از دي متيل سولفوكسايد، متانول و اتيلن گليكول به‌عنوان مواد محافظ سرمايي استفاده گرديد كه هر كدام درغلظت هاي 5، 10 و 20 درصد به رقيق كننده (30 ميلي‌مول تريس، 4/23 ميلي‌مول ساكارز، 25/0 ميلي‌مول كلريد پتاسيم) اضافه شدند. سپس رقيق كننده با نسبت هاي 5/0: 1، 1: 1 و 2: 1 با اسپرم مخلوط شده و سپس اسپرم منجمد شد. در اين تحقيق از اسپرم 3 مولد نر فيل ماهي استفاده شد. اسپرم هاي منجمد شده بعد از 15 و 30 روز از حالت انجماد خارج شدند. آزمايش انجام شده نشان داد كه بالاترين طول دوره تحرك و درصد تحرك اسپرم هاي انجمادزدايي شده بعد از 15 و 30 روز انجماد، در اسپرمي كه داراي دي متيل سولفوكسايد 10 درصد و نسبت رقيق‌سازي 1:1 بود مشاهده شد (به‌ترتيب ثانيه 42/20± 32/230 و درصد 60/2±41/23؛ ثانيه 10/18±20/218 و درصد 90/1±12/20). همچنين كمترين طول دوره تحرك و درصد تحرك اسپرم هاي انجمادزدايي شده بعد از 15 و 30 روز انجماد، در اسپرمي كه داراي اتيلن گليكول 20 درصد و نسبت رقيق‌سازي 2:1 بود مشاهده شد (به‌ترتيب ثانيه 40/18±24/92 و درصد 30/1±20/9؛ ثانيه 80/19±37/65 و درصد 00/1±00/7).بح

Cryopreservation is as an effective way to prevent species extinction risk. In this study, we have investigated the protective effect of different concentrations cryoprotectant and effect of different dilution ratios on sperm motility percent and its motility duration after thaw. For this work dimethyl sulfoxide, methanol and ethylene glycol was used as cryoprotectant, each at concentration of 5, 10 and 20% were added to the extender (30 mM Tris, 23.4 mM sucrose, 0.25 mM KCl, PH 8.0). Then, extender with 1:0.5, 1:1 and 1:2 mixture ratios of the extender and sperms collected and the sperm was frozen. In this study semen obtained from three Beluga males were used. Frozen sperms after 15 and 30 days were excluded from freezing. The results of the experiment showed that highest motility duration and the most motility percentage of post-thawed sperms after 15 and 30 days was related to the sperm with the concentration of dimethyl sulfoxide 10% and the dilution ratio of 1:1 (230.32±20.42 s and 23.41±2.60%; 218.20±18.10 s and 20.12±1.90%, respectively). Also minimum motility duration and the most motility percentage of post-thawed sperms after 15 and 30 days was related to the sperm with the concentration of ethylene glycol 20% and the dilution ratio of 1:2 (92.24±18.40 s and 9.20±1.30%; 65.37±19.80 s and 7.00±1.00%, respectively).