بررسي توالي ژن M2 ويروس‌هاي آنفولانزا جداشده از بيماران ايراني در سال 1393 به‌منظور تعيين مقاومت به آدامانتان‌ها

مقدمه و هدف: آدامانتان‌ها (آمانتادين و ريمانتادين) سال‌ها براي پيشگيري و درمان عفونت با ويروس آنفولانزاي A استفاده شده است. اين داروها ممانعت كننده‌هاي پروتيين M2 اين ويروس مي‌باشند و برخي از جانشيني‌هاي اسيد آمينه در قسمت بين غشايي اين پروتيين سبب مقاومت به اين داروها مي‌شود. اين مطالعه به‌منظور بررسي تغييرات توالي نوكليوتيدي مرتبط با مقاومت به آدامانتان‌هادر ژن M2 ساب‌تايپ‌هاي H1N1 و H3N2 جدا‌شده از بيماران ايراني در سال 1393 صورت گرفت. مواد و روش‌ها: سواب‌هاي بيني گرفته‌شده در تهران طي زمستان سال 1393 از بيماران داراي علايم شبيه آنفولانزا با روش Real-Time Reverse Transcription PCR موردبررسي قرار گرفتند تا حضور ساب‌تايپ‌هاي H1N1 و H3N2 ويروس آنفولانزا تيپ A در آن‌ها تعيين گردد. سپس برخي از نمونه‌هاي مثبت از نظر اين ويروس‌ها در كشت سلولي تكثير داده شدند. براي تكثير ژن M با روش Reverse Transcription PCR و آناليز ژنتيكي چهار جدايه از هر ساب‌تايپ به‌طور تصادفي انتخاب گرديدند. نتايج: مطالعه جهش‌هاي نقطه‌اي در توالي ژن M2 جدايه‌هاي موردبررسي نشان‌دهنده حضور شايع‌ترين جهش منجرشونده به مقاومت به آدامانتان‌ها يعني جايگزيني اسيد آمينه آسپاراژين به‌جاي سرين در موقعيت 31 در همه آن‌ها بود. ساير جهش‌هاي ايجاد‌كننده مقاومت به آدامانتان‌ها يافت نشد. نتيجه گيري: با توجه به نتايج اين مطالعه و گزارش‌هاي ساير محققان كه نشان‌دهنده شيوع بالاي جهش‌يافته‌هاي مقاوم به آدامانتان در جدايه‌هاي انساني ويروس آنفولانزاي A است، پيشنهاد مي‌شود كه آدامانتان‌ها براي درمان آنفولانزا استفاده نشوند.

Background and Objective: Adamantanes, amantadine, and rimantadine have been used for many years for prevention and treatment of influenza virus A infections. These drugs are influenza virus M2 protein inhibitors and some amino acids substitutions in transmembrane portion of this protein cause resistance to them. This study was done for survey of adamantane resistance related nucleotide sequence changes in M2 gene of H1N1 and H3N2 subtypes isolated from Iranian patients in 2014. Materiasl and Methods: Nasal swabs of patients with influenza-like symptoms were collected from Tehran through winter 2014 and were examined by Real Time Reverse Transcription PCR to evaluate presence of subtypes of H1N1 and H3N2 of influenza viruses A in them. Then, some positive samples for these viruses were propagated in cell culture. Four isolates from each subtype were randomly selected for M gene amplification by Reverse Transcription PCR and genetic analysis. Results: The study of point mutations in M2 gene sequence of isolates showed presence of most prevalent adamantane resistance related mutation; substitutions of serine with asparagine in amino acid 31; in all of them. Other mutations conferring resistance to adamantanes were not found. Conclusion: According to results of this study and reports from other investigators, which showed the high prevalence of adamantane resistant mutants in human influenza virus A isolates, it is recommended that adamantanes not be used for the treatment of influenza.