شناسايي و آناليز ژن هاي بيماري زاي يرسينيا انتروكوليتيكا جداسازي شده از شير گوسفند و بز در شهركرد

Identification and characterization of the virulence genes in Yersinia enterocolitica strains isolated from sheep and goat milk in Shahrekord

يرسينيا انتروكوليتيكا يك باكتري گرم منفي و پاتوژن روده اي است كه از طريق آب و مواد غذايي به انسان منتقل مي شود. شير از منابع عمده انتقال عفونت به انسان بوده و آلودگي آن با باكتري مانند يرسينيا انتروكوليتيكا مي تواند براي انسان عوارض زيان باري داشته باشد. اين مطالعه با هدف جداسازي يرسينيا انتروكوليتيكا و ارزيابي ژن هاي بيماري زايي آن از شير نشخواركنندگان كوچك در شهرستان شهركرد به روش كشت ميكروبي و PCR انجام شد. در اين مطالعه مقطعي-توصيفي تعداد 100 نمونه شير گوسفند و بز به تفكيك و به شكل تصادفي در سطح شهرستان شهركرد جمع آوري گرديد و به روش كشت در محيط CIN مورد بررسي قرار گرفت. به منظور شناسايي سروتيپ O:3 يرسينيا انتروكوليتيكا و نيز بررسي حضور ژن هاي بيماري زا، نمونه هاي مثبت به روش PCR در حضور پرايمرهاي اختصاصي مورد بررسي قرار گرفتند. از مجموع نمونه هاي شير گوسفند و بز مورد ارزيابي با روش كشت در 9 نمونه (9 درصد) حامل يرسينيا انتروكوليتيكا بود. تمامي نمونه هاي آلوده از شير گوسفند بودند. از اين ميان، 5 مورد از نظر سروتيپ O:3 با روش PCR مثبت گزارش گرديد. همچنين چهار مورد حامل ژن ail، سه مورد حامل ژن yadA و دو نمونه حامل ژن هاي virF و ystA بودند. با توجه به نتايج حاصله شير گوسفند مي تواند به عنوان منبع بالقوه اي براي آلودگي انسان به يرسينيا انتروكوليتيكا مطرح باشد.

Yersinia enterocolitica is a Gram-negative intestinal pathogen that is transmitted to humans through water and food. Milk is one of the main sources of the infection transmission to humans and its contamination with bacteria such as Y. enterocolitica can cause serious damages. The present study aimed to isolate Y. enterocolitica and its virulence genes from small ruminant milk in Shahrekord, Iran using microbial culture and PCR method. In this cross-sectional descriptive study, 100 raw milk samples were collected randomly from different parts of Shahrekord, and cultured on a CIN agar medium. In order to detect Y. enterocolitica O:3 serotype and to investigate the presence of virulence genes, positive- culture samples were further assessed by PCR method using specific primers. According to the results, 9% of total sheep and goat milk samples were positive after microbial culture. Notably, all positive samples were sheep milk samples. Five percent of the positive samples were confirmed as O:3-positive serotypes using PCR method. The ail gene was found in four isolates, the yadA gene was reported in three isolates, and the virF and ystA genes were identified in two isolates. Isolation of Y. enterocolitica from raw milk was indicated high risks of yersiniosis associated with raw sheep milk. Based on our results, sheep's milk can be considered as a potential cause of human infection to Y. enterocolitica.